第三章 基因工程 章末综合提升（Word教师用书）-【状元桥·优质课堂】2022-2023学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019）

章末综合提升 　界定启动子与起始密码子、终止子与终止密码子 启动子与起始密码子、终止子与终止密码子比较如下： 项目 启动子 终止子 起始密码子 终止密码子 化学 成分 DNA片段 DNA片段 mRNA上三个相邻碱基 mRNA上三个相邻碱基 位置 目的基因首端(上游) 目的基因尾端(下游) mRNA首端 mRNA尾端 作用 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA 决定转录的结束 翻译的起始信号 决定翻译过程的结束 【对点训练1】关于启动子、终止子及密码子的叙述，正确的是(　　) A．启动子和终止子位于DNA上，分别决定DNA的复制的启动与终止 B．起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别决定翻译的启动与终止 C．起始密码子和终止密码子分别转录自启动子和终止子 D．mRNA上有多少种密码子，tRNA上就有多少种反密码子 答案　B 解析　启动子、终止子均位于DNA上，调控基因的转录过程，A项错误；在基因表达过程中，起始密码子和终止密码子位于mRNA上，调控基因的翻译过程，B项正确；起始密码子和终止密码子都转录自基因的编码区，而启动子和终止子都位于基因的非编码区，C项错误；终止密码子一般不对应反密码子，D项错误。 　限制酶的选择原则与方法 1．限制酶的选择原则 根据目的基因两端的限制酶切割位点、质粒上的限制酶切割位点及是否破坏目的基因和标记基因等来确定限制酶的种类——原则上必须使目的基因两端与运载体切口两端出现能“互补”的“末端”。 2．选择方法 　 (1)应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Pst Ⅰ；不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Sma Ⅰ。 (2)为避免目的基因和质粒的自身环化及目的基因与质粒的反向连接，可使用两种切割后能产生不同黏性末端的限制酶切割目的基因所在片段和质粒(双酶切)，如图甲可选择用Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种限制酶的切割位点)，确保目的基因和载体质粒正向连接。 (3)切割质粒的限制酶不能同时切开质粒上的所有标记基因，即至少要保留一个标记基因，以用于重组DNA的鉴定和选择，如图乙中的质粒不能使用Sma Ⅰ切割。 【对点训练2­1】若要利用某目的基因(见图甲)和质粒载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙)，限制性内切核酸酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ (5′—A↓GATCT—3′)、EcoRⅠ(5′－G↓AATTC—3′)和Sau3A Ⅰ(5′—↓GATC—3′)。下列分析合理的是(　　) 　　 A．用EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒载体 B．用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒载体 C．用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和质粒载体 D．用EcoR Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和质粒载体 答案　D 解析　只用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体可能会导致目的基因与载体反向连接以及目的基因自身环化，A项错误；用BglⅡ和EcoRⅠ切割含目的基因的DNA片段，其中含目的基因的片段两端仍是EcoRⅠ切割产生的黏性末端，可能会导致其自身环化，也无法与用BglⅡ和EcoRⅠ切割的质粒载体连接，B项错误；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体会产生相同的黏性末端，可能会发生反向连接和目的基因的自身环化，C项错误；用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体可得到丙图所示重组DNA，且能正常表达，D项正确。 【对点训练2­2】下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： 限制酶 BamH Ⅰ Bcl Ⅰ Sau3A Ⅰ Hind Ⅲ 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G T↓GATCA ACTAG↑T ↓GATC　 CTAG↑ A↓AGCTT TTCGA↑A 　 (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用__________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于______态的大肠杆菌。 (2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加____________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中的_________________________________________________________________。 (3)若BamH Ⅰ酶切的DNA末端与Bcl Ⅰ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为____________________________________，对于该部位，这两种酶______(填