内容正文:
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
学习目标
1.基于动物细胞能够融合的事实,阐明动物细胞融合的概念及需要的条件。
生命观念
2.能基于事实和证据,采用归纳和概括等方法,以文字、图示的形式表示单克隆抗体制备的过程。
科学思维
3.认同生物科技是一把双刃剑,遵循正确的伦理道德,认识到动物细胞融合技术应用的潜在风险。
社会责任
一、动物细胞融合技术
1.概念:使__两个或多个动物细胞__结合形成一个细胞的技术。
2.诱导原理和结果
(1)诱导原理:__细胞膜的流动性__。
(2)诱导结果:形成__杂交__细胞。
3.诱导方法:__PEG融合__法、电融合法和__灭活病毒诱导__法等。
4.意义:突破了__有性杂交__的局限,使__远缘杂交__成为可能。
5.动物细胞融合技术的应用
(1)成为研究__细胞遗传__、__细胞免疫__、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制备__单克隆抗体__。
[点拨] 灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
二、单克隆抗体及其应用
1.传统抗体的制备
(1)方法:向动物体内反复注射某种__抗原__,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。
(2)缺点:产量低、纯度低、特异性差。
2.单克隆抗体的制备
3.单克隆抗体的优点
(1)能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生__特异性__结合。(特异性强、灵敏度高)
(2)可以__大量__制备。
4.单克隆抗体的应用
(1)广泛用作__诊断__试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。
(2)运载__药物__,形成抗体—药物偶联物,实现对肿瘤细胞的__选择性__杀伤。
(3)用于__治疗疾病__。
判断正误
1.灭活的病毒能促进动物细胞融合,也能促进植物细胞融合。(×)
2.动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。(×)
3.单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。(×)
4.杂交瘤细胞的培养可以采取体内培养和体外培养两种方式。(√)
5.将抗原注入小鼠体内,是为了获得能产生相应抗体的B淋巴细胞。(√)
6.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞。(×)
7.单克隆抗体诊断试剂提高了诊断的准确性、灵敏性。(√)
探究点一 动物细胞融合
[问题情境]
阅读教材P48,如图为动物细胞融合的过程图解,请思考回答:
(1)为什么灭活的病毒能作为诱导因素,而不灭活的病毒不能作为诱导因素?
提示:①灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。把两个动物细胞放在一起,用灭活的病毒处理后,先细胞膜融合,然后细胞质融合,最后细胞核融合,进而形成杂交细胞。
②不灭活的病毒会感染细胞,因而不能用于诱导细胞融合。
(2)动物细胞融合中为什么不用两个而用多个细胞进行细胞间融合?
提示:仅用两个细胞进行融合,其效率太低,不一定能得到杂交细胞。更重要的是,当多个细胞进行细胞间融合时,即使两个细胞发生融合,也不一定是研究者期望得到的细胞类型。
(3)比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。
提示:相同点:二者都可以采用PEG融合法、电融合法等方法进行促融。
不同点:动物细胞融合还可以采用灭活病毒诱导进行促融。
[归纳总结]
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
步骤
酶解法去掉细胞壁后,诱导原生质体融合,形成杂种体细胞,再经过植物组织培养形成杂种植株
分散成单个细胞后诱导细胞融合
诱导
方法
物理法:电融合法、离心法等;
化学法:PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等
PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等
结果
形成杂种植株
形成杂种细胞
[典题示例]
1.下列关于动物细胞融合的说法,不正确的是( )
A.常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法、紫外线照射等
B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的细胞称为杂交细胞
C.动物细胞融合就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
D.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
[解析] 常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等,紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方法,A错误。
[答案] A
2.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术,下列论述合理的是( )
A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合
B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离
C.两者都可以体现细胞的全能性
D.在适宜的条件下,均可产生完整个体
[解析] 灭活病毒是动物细胞融合特有的诱导因素