2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体（教学课件）-【上好课】2022-2023学年高二生物同步备课系列（人教版2019选择性必修3）

第2节 动物细胞工程 第2课时：动物细胞融合技术与单克隆抗体 第二章 人教版 选择性必修3 情景导入 1.视频中了解到针对新冠肺炎真正的特效药是什么？ 2.这种特效药有着怎样的特点呢？ 针对新冠病毒的单克隆抗体。 这种单克隆抗体可以和新冠病毒特异性结合，准确定位、药效强、持续时间久，并且可以大量储备生产。 回顾旧知：抗体 产量低、纯度低，而且特异性差 （已免疫的）B淋巴细胞 体外不能无限增殖 （已免疫）B淋巴细胞 能产生抗体 肿瘤细胞 能无限增殖 回顾旧知：抗体 第1节学习的植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新的作物类型。　　　　　 思考：有没有技术让这两种细胞杂交，培育出既能产生抗体，双能大量增殖的细胞呢？ PART 一 动物细胞融合技术 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 4、结果： 形成杂交细胞。即融合后形成的原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 2、原理： 细胞膜的流动性 3、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 一 动物细胞融合技术 5.过程： 病毒颗粒 灭活的病毒颗粒粘附于细胞表面 细胞膜融合 细胞核融合 形成杂交细胞 在病毒的作用下，使细胞互相凝聚 6.意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 一 动物细胞融合技术 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 基本原理 融合前处理 诱导方法 用 途 意 义 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、果胶酶去壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散 培育新品种 制备单克隆抗体 物理法：电融合法、离心法 化学法：PEG，高Ca2+ —高PH融合法 电融合法，PEG融合法，灭活的病毒 植物体细胞杂交和动物细胞融合比较 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 一 动物细胞融合技术 (1)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒(　　) (2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构(　　) (3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞(　　) × √ 判断正误 × 课堂练习 1.(2022·天津市高二阶段练习)如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列叙述正确的是 A.细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合 B.细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质 C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性 D.此过程的原理是动物细胞具有全能性 √ 课堂练习 2.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术，下列论述合理的是 A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合 B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离 C.两者都可以体现细胞的全能性 D.在适宜的条件下，均可产生完整个体 √ 课堂练习 1.传统抗体制备方法及缺陷 缺陷：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 不能无限增殖产生大量抗体 动物体内 抗原 刺激 浆细胞 抗体 筛选单一B细胞 增殖分化 抗原不纯 抗原不纯 如何解决这个问题呢？ 二 单克隆抗体技术及其应用 一个极富创造力的方案： 动物细胞融合 杂交细胞 动物细胞培养 单克隆抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 1975年，米尔斯坦和柯勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 二 单克隆抗体技术及其应用 活动：以小组为单位讨论单克隆抗体的制备过程，时间为7分钟， 选出两位小组代表上台演示 2、单克隆抗体的制备过程 注射特定抗原 从脾脏中获取B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 目的是获得产生特定抗体的B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 与B淋巴细胞融合 诱导融合 多种杂交细胞 选择培养基培养 筛选杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖 又能产生抗体 特点 第一次筛选 二 单克隆抗体技术及其应用 知识拓展：第一次筛选获得杂交瘤细胞 ①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。 筛选出杂交瘤细胞方法？ B淋巴细胞及同型融合细胞 不能无限增殖，死亡 骨髓瘤细胞及同型融合细胞 不能无限增殖，死亡 杂交瘤细胞 能无限增殖，生长 培养基中加入氨基嘌呤 二 单克隆抗体技术及其应用 2、单克隆抗体的制备过程 杂交瘤细胞 第二次筛选 96孔板培养和筛选 筛选抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测 既能迅速