内容正文:
第五章 DNA和蛋白质技术
(三)血红蛋白的提取和分离
蛋白质的各种特性的差异如分子的______和______、所带________________、溶解度、________和对其他分子的亲和力,等等,可以用来分离不同种类的蛋白质。
(一)凝胶色谱法
1.概念:凝胶色谱法也称做__________,是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。
2.原理:大多数凝胶是由________化合物构成的小球体,内部有许多贯穿的通道,当不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量____的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程______,移动速度______;而相对分子质量______的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在________移动,路程______,移动速度______。相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
3.凝胶材料:______性,______类化合物,如葡聚糖或________。
4.具体过程:
(1)________混合物上柱。(2)洗脱开始,______________的蛋白质______进入凝胶颗粒内;相对分子质量______的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。(3)________________的蛋白质被滞留;__________________的蛋白质向下移动。(4)相对分子质量不同的分子完全分开。(5)____________的蛋白质行程较短,已从________中洗脱出来,________________的蛋白质还在行进中。
(二)缓冲溶液
1.作用:在________内,能够抵制外界的________对溶液____的影响,维持____基本不变。
2.配制:通常由________溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的______就可以制得在不同________使用的缓冲液。
(三)电泳
1.概念:带电粒子在______的作用下发生______的过程。
2.原理:许多重要的生物大分子,如______、______等都具有________的基团,在一定pH下,这些基团会带上______或______。在电场的作用下,这些带电分子
第五章 DNA和蛋白质技术
(三)血红蛋白的提取和分离
蛋白质的各种特性的差异如分子的______和______、所带________________、溶解度、________和对其他分子的亲和力,等等,可以用来分离不同种类的蛋白质。
(一)凝胶色谱法
1.概念:凝胶色谱法也称做__________,是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。
2.原理:大多数凝胶是由________化合物构成的小球体,内部有许多贯穿的通道,当不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量____的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程______,移动速度______;而相对分子质量______的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在________移动,路程______,移动速度______。相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
3.凝胶材料:______性,______类化合物,如葡聚糖或________。
4.具体过程:
(1)________混合物上柱。(2)洗脱开始,______________的蛋白质______进入凝胶颗粒内;相对分子质量______的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。(3)________________的蛋白质被滞留;__________________的蛋白质向下移动。(4)相对分子质量不同的分子完全分开。(5)____________的蛋白质行程较短,已从________中洗脱出来,________________的蛋白质还在行进中。
(二)缓冲溶液
1.作用:在________内,能够抵制外界的________对溶液____的影响,维持____基本不变。
2.配制:通常由________溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的______就可以制得在不同________使用的缓冲液。
(三)电泳
1.概念:带电粒子在______的作用下发生______的过程。
2.原理:许多重要的生物大分子,如______、______等都具有________的基团,在一定pH下,这些基团会带上______或______。在电场的作用下,这些带电分子会向着与所带电荷__________移动。电泳利用了分离样品中各种分子__________以及分子本身的______、______不同,使带电分子产生不同的________,从而实现样品中各种分子的分离。
3.分类:________凝胶电泳、__________凝胶电泳。
在测定蛋白质相对分子质量时通常使用__________________凝胶电泳。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带________的多少以及_______