2023届高三生物一轮复习课件 动物细胞工程

一轮复习 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植 基础 克隆猴 中中和华华 考点一 动物细胞培养 概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 原理： 动物细胞培养 培养对象： 细胞增殖（有丝分裂） 动物组织的选择幼龄动物或老龄动物 幼龄个体的细胞分化程度低、分裂能力强，易培养。 动物体 组 织 单个细胞 取出 分散 需要哪些条件呢？ 适宜条件 细胞生长 和增殖 1、营养： 由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时，通常需加入血清和血浆等一些天然成分。 成分：将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量 严格配制而成的培养基，称为合成培养基。 培养细胞动物时一般使用液体培养基，也称培养液 2.无菌、无毒的环境 如果要防止培养过程中微生物的污染，还可以在细胞培养液中添加一定量的抗生素。 需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 在无菌环境下操作 培养液还需要定期更换 （以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害） 3.温度、pH和渗透压 一般与动物体内相同 ①适宜的温度： ②适宜的pH： 多数动物细胞生存的适宜pH为 。 7.2-7.4 ③适宜的渗透压： 维持细胞正常的形态和功能。 哺乳动物细胞培养的温度多以 为宜。 36.5±0.5℃ 4.气体环境 ①气体的组成及作用 95%空气 5%CO2 ②培养装置: 培养皿或松盖培养瓶 CO2培养箱 置于 维持培养液的pH 细胞代谢所必需 可以用胃蛋白酶处理吗？ 不可以，pH不适宜。 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，去掉组织间蛋白，将组织分散成单个细胞 动物组织处理后的初次培养 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。 取动物组织 制成细胞悬液 放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养 体外培养的动物细胞 悬浮生长类： 会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 贴壁生长类： （大多数） 除受以上因素影响外，还会发生接触抑制现象。 动物细胞培养的过程 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。 原因： a.从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖； b.能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。保证细胞所需的营养物质的供应及有害产物的及时排出。 分瓶后的细胞培养 取动物组织 制成细胞悬液 放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养 放入CO2 培养箱中培养 传代培养 悬浮生长类：直接用离心法收集贴壁生长类：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。 动物组织块 分散成单个细胞 加培 养液 细胞悬液 原代培养 放入培养瓶在适宜条件 适宜条件分瓶培养 传代培养 思考1.什么样的动物材料更容易成功呢？ 原因: 细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养） 动物组织块 分散成单个细胞 加培 养液 细胞悬液 原代培养 放入培养瓶在适宜条件 适宜条件分瓶培养 传代培养 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 思考2.用什么方法可以将动物组织块分散成单个细胞？ 动物组织块 分散成单个细胞 加培 养液 细胞悬液 原代培养 放入培养瓶在适宜条件 适宜条件分瓶培养 传代培养 思考3.常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 说明细胞间的物质主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 动物组织块 分散成单个细胞 加培 养液 细胞悬液 原代培养 放入培养瓶在适宜条件 适宜条件分瓶培养 传代培养 思考4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？ 细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。 因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。 动物组织块 分散成单个细胞 加培 养液 细胞悬液 原代培养 放入培养瓶在适宜 条件 适宜条件分瓶培养 传代培养 思考5：体外培养动物细胞分为哪两类？ ①悬浮生长细胞：细胞能够悬浮在培养液中生长増殖 ②贴壁生长细胞 细胞需要贴附于某些基质（如培养瓶壁）表面才能增殖（主要类型） 动物组织块 分散成单个细胞 加培 养液 细胞悬液 原代培养 放入培养瓶在适宜 条件 适宜条件分瓶培养 传代培养 思考6：为什么要将动物组织