2.2.1动物细胞培养课件-2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

基础 动物细胞融合 动物细胞核移植 2.2动物细胞工程 动物细胞培养 动物体 组织 单个细胞 细胞生长和增殖 取出 分散 适宜条件 原理：细胞增殖（有丝分裂）。 一、动物细胞培养的概念 目的： 获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 一、动物细胞培养的条件 5 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 充足的营养、稳定的内环境 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基 含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。 培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分 一般用液体培养基， 也称为培养液 7 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 ①培养液、培养用具：灭菌处理； ②无菌操作； ③适量添加抗生素 ★定期更换培养液，以便清除代谢物。 ①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以_______________ 为宜； ②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为______________； ③适宜的渗透压：________________________________ 维持细胞正常的形态和功能。 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 一、动物细胞培养的条件 8 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 维持培养液的pH 95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱 O2：细胞代谢所必需 CO2培养箱 松盖培养瓶 培养皿 取动物组织 1.选择怎样的动物组织培养成功率会更高？ 为什么？ 幼龄动物的细胞、分化程度越低的细胞。 原因：分裂能力强，易于培养。 三、动物细胞培养的过程 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 2.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？可用什么方法？ 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞生长和增殖。 取动物组织 ①这说明细胞间的物质主要是什么成分？ ②用胃蛋白酶行吗？ 三、动物细胞培养的过程 思考.实验过程中，胰蛋白酶处理时间过长，会出现什么结果？ 取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 细胞悬液 加培养液 3.体外培养动物细胞有哪些类型？ 第1类：悬浮生长细胞 细胞能够悬浮在培养液中生长增殖。 第2类：贴壁生长细胞（多数） 细胞需要贴附于某些基质(如培养瓶壁)表面才能增殖。 三、动物细胞培养的过程 取动物组织 分散成单个细胞 传代培养 细胞悬液 原代培养 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分瓶 培养 加培养液 三、动物细胞培养的过程 思考：“细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖，出现接触抑制的现象”试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因。 癌细胞；癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少 肿瘤细胞失去接触抑制， 条件适宜在培养液可以无限增殖下去。 取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 解决 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞密度过大、 有害代谢物积累、 营养物质缺乏等 接触抑制 传代培养 细胞悬液 原代培养 分瓶 培养 加培养液 细胞分裂受阻 三、动物细胞培养的过程 悬浮培养的细胞:直接用离心法收集 贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集 取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 解决 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 接触抑制 传代培养 制成细胞悬液 原代培养 分瓶 培养 加培养液 在培养皿或培养瓶内 细胞分裂受阻 ② 制成细胞悬液，分瓶培养 ① 收集细胞 二、动物细胞培养的过程 思考：用胰蛋白酶两次处理的目的是？ 第一次处理的目的是使组织细胞分散开； 第二次处理的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，分散成单个细胞，便于分瓶后继续培养。 ①悬浮生长细胞：原代培养→分裂受阻→离心法收集→制成细胞悬液传代培养。 ②贴壁生长细胞：原代培养→分裂受阻→胰蛋白酶处理→离心法收集→制成细胞悬液传代培养。 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 遗传物质改变 遗传物质可能改变 多数细胞固定在表面生长和分裂 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 保持细胞正常二倍体核型 （遗传物质没改变） 思考：正常细胞能否一直传代培养下去？ 细胞发生了突变，可无限增殖。 注意：传代培养的细胞一般传至10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。 课堂小结 培养条件 培养过程 营养：合成培养基+血清 其他 无菌无毒 温度，pH和渗透压 气体环境 动物细胞培养 取动物组织 分散成单个细胞 传代培养 细胞悬液 原代培养 植物组织培养 动物细胞培养 原理 取材 培养基性质 特有成分 结果 是否体现细胞的全能性 植物细胞的全能性 细胞增殖（有丝分裂） 离体植物器官、组织、细胞 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 蔗糖，植物激素 葡萄糖，血清 固体 液体(培养液) 一般获得新的植株 获得大量细胞 是 否 比较：动物细胞培养与植物组织培养有什么相同和不同之处？ 植物组织培养 动物细胞培养 过程 相同点 ①培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及 减数分裂。 ②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件。 取动物组织 细胞悬液 原代培养 分瓶 传代培养 分散成单个细胞 胰蛋白酶 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 试管苗 完整植株 移栽成活 高度分化的动物细胞发育潜能较低，失去了发育成完整个体的能力， 所以动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了 为什么动物细胞培养没有脱分化过程？ 学习内容 干细胞培养及其应用 三、干细胞培养及其应用 动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞 1.干细胞概念： 2.特点：体积较小，细胞核大，核仁明显。 $