1.2.2 微生物的选择培养和计数（教学课件）-【上好课】2022-2023学年高二生物同步备课系列（人教版2019选择性必修3）

第2节 微生物的基本培养技术及应用 第2课时：微生物的选择培养和计数 第一章 人教版 选择性必修3 选择培养基 一 微生物的选择培养 二 微生物的数量测定 三 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 四 CONTENTS 目录 1.科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。 1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 美国黄石公园 那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 一 选择培养基 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 2.筛选原则 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 有利于目的菌生长的条件有哪些？ 营养、温度和pH等 一 选择培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 ④加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 ⑤金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 ③不加含碳有机物的无碳培养基 ②不加氮源的无氮培养基 ①加入青霉素的培养基 3.选择培养基： 一 选择培养基 选择培养基与鉴别培养基的比较 项目 选择培养基 鉴别培养基 原理 用途 举例 图示 加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质 加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应 培养、分离出目标微生物 鉴别目标微生物 培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌 可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色) 一 选择培养基 1.选择培养基的作用 稀释涂布平板法：必须要对土样充分稀释后，然后将菌液涂布到制备好的选择培养基上。 2.微生物选择培养获取纯培养物的方法 分离并计数某种微生物的数量（例如，能分解尿素的细菌）。 二 微生物的选择培养 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g 在火焰旁将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 3.稀释涂布平板法的操作过程 二 微生物的选择培养 二 微生物的选择培养 微量 移液器 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入恒温箱培养。 二 微生物的选择培养 探讨点　微生物的选择培养和计数 1.通常1 g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中，细菌的数量最多，能分解尿素的细菌是其中的一部分。如何设计培养基的配方，从而将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 提示　设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 2.用平板划线法接种培养结果的图片如下。请结合图片分析，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？ 提示　不能，平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。 核心探讨 3.请计算：4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为 个。 1.1×108 4.通过稀释涂布平板法统计的细菌的数目与它的实际数目相同吗？ 提示　统计的细菌数往往比活菌实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 核心探讨 比较 平板划线法 稀释涂布平板法 工具 接种环 涂布器 原理 通过接种环在琼脂固体培养基的表面_________操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。（不能计数） 将菌液进行一系列的_________，稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞。（可计数） 特点 方法简单，但不适宜计数 单菌落更易分开，可以计数，但操作复杂 平板 示图 共同点 使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落 连续划线 梯度稀释 两种纯化方法的比较 判断正误 (1)选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物的