1.2 微生物的基本培养技术（第2课时）-【轻松学生物】2022-2023学年高二生物同步教学精优课件（人教版2019选择必修3）

一、微生物的基本培养技术 （第二课时） 2.酵母菌的纯培养 (1)原理 采用平板划线法和稀释涂布平板法，能将单个微生物分散在固体培养基上后，经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖而形成的菌落。 菌落特征（如大小形状、边缘表面、质地颜色等）是衡量菌种纯度、辨认鉴定菌种的重要依据 (2)材料用具 1配制培养基 (3)方法步骤 称取去皮的马铃薯200g 加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂 向滤液加入20克葡萄糖用玻棒搅拌以加速溶解 分瓶后各加琼脂摇匀，包瓶口并用橡皮筋勒紧 用纱布过滤后，加蒸馏水至1000mL 2灭菌 加棉塞、包牛皮纸、橡皮筋勒紧 培养基装入锥形瓶，加棉塞，包牛皮纸扎紧，高压蒸汽灭菌； 培养皿5～8套作一包，放于干热灭菌箱内灭菌 100KPa121℃下维持15-30min 哪经配制、灭菌的培养基可即给微生物“大餐”了吗，还需要什么环节？请阅读课本P12的图解，了解各步骤的注意问题有哪些？ 经烹调的菜式，需要上盘分餐以便供客人用餐食用 3 倒平板 培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 ①在火焰旁，右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞； 思考1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么 办法来估计培养基的温度？ 可用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 ②右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰 思考2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 ③左手将培养皿打开缝隙，右手将培养基倒入培养皿，即盖上皿盖。 ④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。 思考3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上 会凝结水珠，凝固后 的培养基表面的湿度 也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，造成污染。 1.下列关于制备酵母菌固体培养基的说法,错误的是(　　) A.操作顺序为称量、煮沸至软烂、倒平板、灭菌 B.将煮至软烂的马铃薯用纱布过滤至烧杯中 C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D.待平板冷却凝固5~10 min后将平板倒过来放置 A 2.制备酵母菌固体培养基的步骤是( ) A．称量、倒平板、煮沸至马铃薯软烂、灭菌 B．称量、煮沸至马铃薯软烂、倒平板、灭菌 C．称量、煮沸至马铃薯软烂、灭菌、倒平板 D．称量、灭菌、煮沸至马铃薯软烂、倒平板 C 3.制作酵母菌培养基时，倒平板操作的步骤是：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出       ；右手拿锥形瓶，将     迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的_______倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却      后，将平板倒过来放置，使      在下、     在上。 棉塞 瓶口 培养基 凝固 皿盖 皿底 (1)从成分上来说，该培养基中除了水和无机盐，牛肉膏和蛋白胨为大肠杆菌既能提供         ，又能提供        。 (2)培养大肠杆菌前，需要将培养基进行严格的灭菌处理，常用的方法是                。 (3)若大幅度提高培养基中NaCl的含量，可用于筛选耐盐的细菌，这种培养基被称为        培养基。 4.某兴趣小组制备牛肉膏蛋白胨固体培养基并用来培养大肠杆菌，牛肉膏蛋白胨固体培养基的配方如下表。请分析回答有关问题: 碳源 氮源 高压蒸汽灭菌 选择 （二）接种和分离酵母菌 纯化培养（接种方法） 平板划线法 稀释涂布平板法 培养基“大餐”准备完毕，怎样把微生物客人邀请过来呢？ 为何播种时要逐粒将豆子散播中土中？ ★平板划线法★ 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。 接种环 连续划线 逐步稀释 得到单个菌落 1.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 操作前灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 思考1.为什么在操作前要灼烧接种环？ 2.在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞。 16 3.将试管口通过火焰 目的是经灼烧灭菌，防止试管口的微生物污染菌种 4.将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液 冷却的目的是避免接种环温度太高而杀死菌种 17 5.将试管口通过火焰，并塞上棉塞。 6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三到五条平行线 7.灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作。 思考1：每次划线之前都要灼烧接种环？ 杀死上次残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种直接来源