内容正文:
第2节 动物细胞培养
第2章 细胞工程
动物细胞工程常用的技术:
动物细胞培养
动物细胞融合
动物细胞核移植等
动物细胞工程的基础
1
一 动物细胞培养
2
从社会中来
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
通过细胞培养构建的人造皮肤
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增;
目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤;
1.概念
从动物体中____相关的____,将它_____________,然后在_____________下,让这些细胞_____和_____的技术;
2.原理:__________________
3.地位:__________________
取出
组织
分散成单个细胞
适宜的培养条件
生长
增殖
细胞增殖(有丝分裂)
动物细胞工程的基础
动物细胞培养
动物细胞培养的条件
营养条件
其他条件
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
一、动物细胞培养的条件
血清中不仅含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种营养物质,还有激素及多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。
(1)成分
①已知成分
将细胞所需的________(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按其_____和_______严格配制而成的培养基,称为___________
②未知成分
使用合成培养基时,通常需加入____等一些天然成分
原因:_ ______________________________________
(2)培养基的物理性质
培养动物细胞一般使用_________,也称为______
营养物质
种类
所需量
合成培养基
血清
血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质
液体培养基
培养液
一、动物细胞培养的条件
1.营养
不包括淀粉、蔗糖等
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①对______和____________进行_____处理;
②在________下进行操作;
③还需要______________。
培养液
所有培养用具
灭菌
无菌环境
定期更换培养液
在细胞培养液中添加一定量的抗生素
一、动物细胞培养的条件
2.无菌、无毒的环境
目的:以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
如何防止培养过程中的微生物污染?
思考?
①适宜的温度
哺乳动物细胞培养的温度多以 ___________为宜;
②适宜的pH
多数动物细胞生存的适宜pH为________
③适宜的渗透压
维持适宜渗透压的目的______________________
36.5±0.5℃
7.2-7.4
维持细胞正常的形态和功能
一、动物细胞培养的条件
3.温度、pH和渗透压
(1)组成
动物细胞培养所需气体主要有___和____
(2)不同气体的作用
①O2:_____________________
②CO2:_________________________
(3)培养容器
通常采用_______或____________
(4)培养仪器
含有 ___和___ _的混合气体的__________
O2
CO2
O2是细胞代谢所必需的
CO2的主要作用维持培养液的pH
培养皿
松盖培养瓶
95%空气
5%CO2
CO2培养箱
一、动物细胞培养的条件
4.气体环境
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养
分瓶
进行传代培养
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养
放入CO2培养箱中培养
传代培养
放入CO2培养箱中培养
细胞贴壁
接触抑制
二、动物细胞培养的过程
①原代培养
通常将________的细胞培养,即动物组织经_____后的________称为原代培养;
②传代培养 将______的细胞培养称为传代培养;
③细胞贴壁 ______体外培养的细胞需要______________ ___才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的____上,这种现象称为细胞贴壁;
分瓶之前
处理
初次培养
分瓶后
大多数
贴附于某些基质表面
瓶壁
重要名词解释
二、动物细胞培养的过程
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二、动物细胞培养的过程
④接触抑制
当_____细胞生长到__________ _时,细胞通常会____________;
重要名词解释
贴壁
表面相互接触
停止分裂增殖
接触抑制
打破接触抑制的方法:将贴满瓶壁的细胞