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第2章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
[学习目标]
1.举例说出动物细胞融合的概念、原理及应用。
2.举例说出单克隆抗体的原理及应用。
3.单克隆抗体的制备过程。
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
[对应学生用书第42页]
一、动物细胞融合技术
1.概念:使 两个或多个动物细胞 结合形成一个细胞的技术。
2.诱导原理和结果
(1)诱导原理: 细胞膜的流动性 。
(2)诱导结果:形成 杂交 细胞。
两个或多个动物细胞
细胞膜的流动性
杂交
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
3.诱导方法: PEG融合法 、电融合法和 灭活病毒诱导 法等。
4.意义:突破了 有性杂交 的局限,使 远缘杂交 成为可能。
PEG融合法
灭活病毒诱导
有性杂交
远缘杂交
5.动物细胞融合技术的应用
(1)成为研究 细胞遗传 、 细胞免疫 、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制备 单克隆抗体 。
细胞遗传
细胞免疫
单克隆抗体
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
二、单克隆抗体
1.制备原理
(1)B淋巴细胞特点:一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
(2)骨髓瘤细胞特点:能在体外大量 增殖 。
(3)杂交瘤细胞特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞整合得到的杂交瘤细胞,既能 无限增殖 又能产生大量 特定抗体 。
增殖
无限
增殖
特定抗体
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
2.制备过程
填一填:基于单克隆抗体制备的过程,完成以下填空:
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
(1)A操作注射特定的抗原,目的是可以从小鼠的脾中得到 产生特定抗体的B淋巴 细胞。
(2)杂交瘤细胞技术选择融合的两种细胞:细胞① 多种B淋巴细胞 ,细胞② 骨髓瘤细胞 。
(3)过程B和C为诱导细胞融合的过程,获得的细胞③是 多种 (填“一种”或“多种”)。
(4)细胞③到细胞④的过程使用特定的选择培养基进行筛选,只有细胞④ 杂交瘤 细胞才能生长,其他细胞不能生长。
产生特定抗体的B淋
巴
多种B淋巴细胞
骨
髓瘤细胞
多种
杂交瘤
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
(5)细胞⑤来源于细胞 ④ (填数字序号),细胞⑤为抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞,其分泌的抗体 能与特定的抗原结合 。
(6)培养杂交瘤细胞的方法是注射到小鼠腹腔和D 体外培养 ,从培养液或小鼠腹水中可提取⑥ 单克隆抗体 。
④
能与特定的抗原结合
体外培养
单克隆抗体
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
3.单克隆抗体的优点
能准确地识别 抗原的细微差异 ,与特定抗原发生特异性结合,并且可以 大量制备 。
抗原的细微差异
大
量制备
4.单克隆抗体的应用
(1)作为 诊断试剂 ,具有准确、高效、简易、快速的优点。
(2)用于 治疗疾病 和 运载药物 。
诊断试剂
治疗疾病
运载药物
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
判断正误,正确的打“√”,错误的打“×”。
(1)动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。 ( √ )
(2)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒。( × )
√
×
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
(3)用特定的抗原对小鼠进行免疫后,从小鼠脾脏中只能得到一种B淋巴细胞。( × )
(4)单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。( × )
(5)单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。( × )
×
×
×
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
[对应学生用书第43页]
知识点一 动物细胞融合
如图为灭活的病毒诱导细胞融合的过程示意图,请思考回答:
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第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
(1)动物细胞融合的结构基础是什么?
提示:细胞膜的流动性。
(2)融合处理后的细胞是否可以直接用于培养?为什么?
提示:不可以。因为诱导融合只是促使细胞间的融合,不能保证所有细胞都发生融合,形成的融合细胞也有多种,因此需要筛选。
(3)比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。
提示:相同点:二者都可以采用PEG融合法、电融合法进行促融。
不同点:动物细胞融合还可以采用灭活的病毒诱导进行促融。
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
1. 对动物细胞融合过程的理解
(1)细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合,其中细胞膜的融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有流动性。
(2)动物细胞融合完成的标志:来自不同细胞的两个或多