2023届高三高考生物一轮复习导学案：30.微生物的实验室培养与应用

蜀光中学高2020级一轮复习学历案（课堂探究） 编号：SW一轮复习-30 主备人：杨军 第30讲 微生物的实验室培养与应用 【学习目标】 1.通过对酵母菌的分离的实验，归纳微生物的实验室培养的基础知识。 2.通过大肠杆菌的纯化培养，归纳总微生物的分离方法与具体操作过程。 3.通过对土壤中尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与计数，了解微生物的培养与应用。 【重点】 1.微生物的实验室培养的基础知识。 2.了解微生物的分离、纯化、计数及微生物的应用。 【难点】微生物的分离、纯化、计数及微生物的应用。 情景一：在自制果酒时，常利用水果上的野生型酵母菌进行发酵。这样的发酵方式效率往往较低，而且在早期发酵时，其它杂菌也在繁殖，产生一些可能有害的物质，影响果酒品质。 如果在发酵液中加入纯化的菌种，可以提高发酵的效率。在此我们尝试用微生物培养技术，从果酒中分离、纯化酵母菌。 任务一：尝试从果酒分离纯化酵母菌，并归纳总结微生物实验室培养的相关知识。 1.为培养微生物（包括酵母菌）提供营养件——培养基 ⑴.概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其_________的营养基质。 培养酵母菌的培养基常用： ； 培养大肠杆菌的培养基常用： 。 ⑵.培养基类型 常见选择培养基举例： ①缺少 的培养基可以筛选出（自生）固氮微生物。 ②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出 。 ③无有机碳源的培养基可筛选出 。 ⑶. 分析培养基的主要成分 特别注意： 除了上表中主要营养物质外，还需要满足微生物生长对________________的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加__________；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至________；在培养细菌时，一般需要将培养基调至_____________；在培养厌氧微生物时，需要提供________的条件。 2.防止菌的入侵——无菌技术 ⑴.分离纯化酵母菌中用到消毒和灭菌的方法有哪些？这些方法的总体目的是什么？ ⑵.归纳常用的消毒和灭菌的方法 其他操作 ①做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与___________接触。 ②为避免周围环境中微生物的污染，许多具体操作都应在超净工作台上并在　　 　　附近进行。 3.微生物的接种方法主要有：_____________________________ 4.菌种的保藏方法 情景二：大肠杆菌是人体肠道中数量最多的细菌，它对人体有益还是有害？ 任务二.归纳实验室大肠杆菌的纯化培养 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基 注意事项： (1)培养基要冷却到 左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 (2)倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条 ，不要完全打开，以免 。 (3)平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可防止____________ _______________，又可防止__________________________________________。 2.分离纯化大肠杆菌的方法 (1).平板划线法(分区划线，具体操作略) 操作注意事项： 1.取菌种之前、每次划线之前及整个划线操作结束时，都需灼烧接种环： 2.第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，这样做的目的是什么？ 3.平板划线时最后一次划线为何不能与第一次划线相连？ 4.接种环灼烧后，要冷却后才能接触菌液，以免 。 划线时用力要大小适当，防止用力过大 。 ⑵.稀释涂布平板法的操作 ①.梯度稀释 用 取1mL菌液加入盛有9mL 的试管中，即得101倍稀释液，如图，依次得稀释倍数为101～106的稀释液。 ②.涂布平板 用移液器取 菌液，滴加到培养基表面；将 浸在盛有 的烧杯中。将涂布器放在火焰上 ，待酒精燃尽、涂布器 后，再进行涂布。用涂布器将菌液 在选择培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。完成以上操作后进行：培养、观察、挑选菌落等。 小结：两种纯化（或接种）方法的比较 情景三：土壤中微生物的“大本营”，其中有许多可以利用的细菌、真菌、放线菌等，包括能分解尿素的细菌。如何分离土壤中这些微生物？每克土壤样品究竟含有多少这样的细菌？ 任务三.阅读教材，观看视