1.2.2 微生物的选择培养和计数（学案） - 【新课程学案】新教材2022-2023学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019）

|生物学选择性必修3│xNKECHENGxUEAN 第2课时 1.阐明微生物选择培养的原理和用途。 微生物的选择培养和计数．2.概述测定微生物数量的方法。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 ……… 〔52学31落实必备知识 开卷预习一刻钟[特别提醒] 将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精 一，主干知识填一填的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然 （─)选择培养基及微生物的选择培养后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。 1.实验室中微生物筛选的原理（3)培养分离：待涂布的菌液被培养基吸收 人为提供有利于目的菌生长的条件(包括⋮后，将平板_，放人的恒温培养 营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生⋮箱中培养1~2d。在涂布有合适浓度菌液的平 物的生长。板上就可以观察到分离的。 2.选择培养基（二)微生物的数量测定 是指在微生物学中，允许_的微│1.稀释涂布平板法__ 生物生长，同时-其他种类微生物 生长的培养基。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的 3.微生物的选择培养(稀释涂布平板法）计数一个-，来源于样品稀释液中的一个活 （1)系列稀释操作(以土壤样品为例） __目_国-国-目～面三标准│的平板进行计数 ①将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥样品的_____将直接影响平板上的菌落数 形瓶中，充分摇匀。计数│-。通常选用一定稀释范围的样品液进行培 ②取1mL上清液加入盛有9mL_—上方法│的平板。在下，应至少对个 的试管中，依次等比稀释。平板进行重复计数，然后求出平均值 （2)涂布平板操作 取菌液）一取0.1mL菌液，滴加到表面墨2.显微镜直接计数法_____ _____________．方法的样品中微生物的数量 │涂布[用涂布器将二均匀地涂布在优点是一种常用的，快速直观的测定微生物数量的 后培养基表面。涂布时可转动培方法”一__________ |14)■Ⅲ XINKECHENG XUEAN第1章发酵工程 (三)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 三、边角知识辰一展 ①上壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它] 1.(教材第18页“相关信息”思考)细菌计数板和血细胞 分离 原理 能合成 计数板主要适用于什么微生物的计数？ ②配制以为唯氨源的培养基，能够生长的 细菌就是能分解尿茶的细菌 上壤 2.(教材第18、19页“探究·实践”思考)利用尿素做唯 在酸碱度接近 取样 的潮湿土嚷中取样 一氮源的选择培养基筛选出能分解尿素的细菌后，还 分 样品 一般选用 倍 可以利用什么方法进一步鉴定分离出的菌种？ 过程 稀释 稀释液 培养、 每隔24h统计 ·次菌落数目，选取 观察 的记录作为结果 ① 可作为南种鉴定的重要依据 掩卷归拢5分钟 ②在培养基巾加入翰红指示剂，若指示剂变 鉴定 计数 红，可确定纵闲能分解尿素 一、知识脉络星一理 ③统计平板的肉落数，计算每克十样巾的尿素分 解闲的数月 微生物的选择培养和计数 二、重要图示品一品 逃择培养 数量测定 (教材第20页“拓展应用”第2题) 选择培 筛选 选择培养 原理 统计方法 如图是几种纤维素分解菌在刚果 养基的原理 (稀释涂布 :特点 及实 平板法) 红培养基上形成的透明圈的示意 稀释涂布 显微镜直 例 平板法 接计数法 图，请分析原理。 二、结论语句纪一记 1.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显 微镜直接计数法。 2.稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果 往往比实际活菌数目低。 3.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可可用尿 素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。 2四1￥习为容2 融通关键能力 提能点（一） 稀释涂布平板法与微生物的选择培养 任务驱动 :(1)对样品悬液怎样进行梯度稀释？ 菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也 可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检 样品进行卫生学评估提供证据。如图是某样品选择培 (2)涂布器一般是在酒精中浸泡，然后放在酒精 养简化流程图，请分析回答下列问题： 灯火焰上灼烧灭菌，该操作的目的是什么？ 样品 样品悬液 梯度稀释 涂布 了15 |生物学选择性必修3 XINKECHENG XUEAN (3)下图是涂布平板操作的示意图，用字母和箭 续表 头表示涂布平板操作的正确步骤。 平板划线法 稀释涂布平板法 涂布器 (1)接种环的灼烧：①第(1)稀释操作时：盛有 次划线前：杀死接种9mL无菌水的所有试 6 环上的微生物，避免污管、移液管等均需灭菌； 染培养物；②之后每次操作时，试管口和移液 划线前：杀死上次划线管应在离火焰1~2cm (4)利用稀释涂布平板法纯化分解尿素的细菌 后残留菌种，保证每次处。(2)涂布平板时： 时，经培养后发现培养基上出现多种菌落， 划线菌种来自上次划线①涂布