2023届高考生物一轮专题复习课件：微生物的培养技术及应用

专题十四　微生物的培养与应用 考点四十二 微生物的培养技术及应用 1 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 1．对培养基的认识 (1)培养基的主要成分 营养物质 含义 作用 主要来源 碳源 能提供碳元素的物质 构成细胞的物质，对异养生物来说，碳源也是能源物质 无机物：CO2、NaHCO3等；有机物：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼、牛肉膏等 氮源 能提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及其他含氮物质 无机物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 生长因子 微生物生长必不可少的微量有机物 酶和核酸的成分 维生素、氨基酸、碱基等 水 细胞生命活动必不可少的物质 不仅是良好的溶剂，还是结构物质 培养基、大气、代谢产物 无机盐 提供除碳、氮元素以外的各种重要元素，包括某些大量元素 作为细胞的组成成分；生理调节物质；某些化能自养细菌的能源物质；酶的激活剂等 培养基 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 (2)培养基的分类 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质 液体培养基 不加凝固剂 主要用于工业生产 固体培养基 加凝固剂，如琼脂 用于微生物分离、鉴定及活菌计数等 功能 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，用来抑制不需要的微生物的生长，或者促进所需要的微生物的生长 培养和分离特定微生物(如分离细菌和真菌时，可以在培养基中加入青霉素) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如用伊红亚甲蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色并带有金属光泽) 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 (3)培养基的配制原则 ①目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等选择原料配制培养基，如培养自养微生物就不用加入有机营养物质。 ②营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 ③pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 ①自养微生物与异养微生物划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或唯一碳源，与氮源无关。两者所用培养基的区别可总结如下： 营养类型 碳源 氮源 生长因子 自养 CO2、NaHCO3等含碳无机物 NH3、铵盐、硝酸盐等 一般不需要 异养 糖类、脂肪酸等 铵盐、硝酸盐、蛋白质等 有些微生物需要 ②微生物最常用的碳源和氮源：最常用的碳源是糖类；最常用的氮源是铵盐和硝酸盐。对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源。 ③琼脂的作用：加入培养基中的琼脂只起凝固作用，一般不能被微生物利用。 ④蛋白胨主要提供氮源，也能提供碳源和维生素；牛肉膏既可作氮源也可作碳源， 还能提供无机盐和维生素。 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 2．无菌技术 获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染，方法包括消毒和灭菌。 方法 概念 常用方法 应用的范围 消毒 使用较为温和的物理、化学或生物方法杀死物体表面或内部一部分微生物 煮沸消毒法：在100 ℃煮沸5～6 min 一般物品 巴氏消毒法：在62～65 ℃消毒30 min或80～90 ℃处理30 s～1 min 一些不耐高温的液体，如牛奶 化学药物消毒法 如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等 紫外线消毒法：用紫外线照射30 min 接种室、接种箱、超净工作台 灭菌 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌：在酒精灯火焰的充分灼烧层灼烧 接种工具等 干热灭菌：放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃的热空气中维持2～3 h 玻璃器皿、金属用具等 湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌。如在高压蒸汽灭菌锅内，100 kPa、121 ℃维持15～30 min 培养基及容器 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 紫外线消毒的原理是破坏微生物体内的DNA或RNA，其他无菌技术的原理都是使微生物中的蛋白质变性。 考法四　微生物培养的基本技术 分考点讲解 3．平板划线法和稀释涂布平板法的比较 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 示意图 注意事项 ①接种环的灼烧 a.第一次划线前灼烧：为了杀死接种环上原有的微生物； b.以后每次划线前灼烧：为了杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端； c.划线结束后灼烧：为了杀死接种环上残存的菌种，避免污染环境和感染操作者。 ②灼烧过的接种环，要待冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 ③划线时最后一区域不要与第一区域相连。 ④划线时用力要适当，防止用力过大将培养基划破 ①稀释操作时，每支试管及其中的 9 mL水、移液管均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在