内容正文:
补充说明 2.1 双缩脲试剂
新教材•人教版•必修一
一.蛋白质与双缩脲试剂
一.蛋白质与双缩脲试剂
1.双缩脲试剂
双缩脲试剂A液:0.1g/mLNaOH
双缩脲试剂B液:0.01g/mLCuSO4
使用时:先加A液2ml(创造碱性环境),再加4滴B液
一.蛋白质与双缩脲试剂
2.脲和双缩脲
(1)脲:就是尿素(又称碳酰胺化学式是CH4N2O)
(2)双缩脲:就是将脲(尿素)缓慢加热后使两分子尿素失去一分子氨缩合而成的化合物
双缩脲形成过程
一.蛋白质与双缩脲试剂
3.双缩脲的颜色反应原理
(1)双缩脲试剂最初是用来检测双缩脲的。
(2)原理是:在碱性环境下,Cu2+离子与酰胺键中的氮进行络合,形成紫色的络合物,定性检测酰胺键的存在以证明多肽的存在。
双缩脲络合物(紫色)
Cu2+ +
OH-
配位化合物也叫络合物,由中心原子或离子(统称中心原子)和围绕它的称为配位体(简称配体)的分子或离子,完全或部分由配位键结合形成。
双缩脲试剂可以检测含有两个及两个以上肽键的化合物
一.蛋白质与双缩脲试剂
4.蛋白质与双缩脲试剂的反应
双缩脲试剂可以检测含有两个及两个以上肽键的化合物
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键, 因此, 蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
(蛋白质-Cu2+复合物)在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10~120g/L范围内有良好的线性关系。
一.蛋白质与双缩脲试剂
5.双缩脲试剂检测的物质有哪些?
(1)凡分子中含有两个或两个以上酰胺键(肽键)的化合物如多肽、蛋白质等都能与双缩脲剂发生紫色反应。
(2)氨基酸分子中没有肽键,二肽分子中只有一个肽键,所以双缩脲试剂不能用于检测二肽和氨基酸。
(3)另外,与双缩脲试剂反应的物质不一定都是蛋白质或多肽,因为NH3与Cu2+也可以紫色络合物。
(4)紫色络合物顔色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。
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