内容正文:
第2章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
授课:谢志强
QQ:408904041
从社会中来
皮肤移植问题
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。利用动物细胞工程通过细胞培养构建的人造皮肤有助于解决此类问题。
一、动物细胞培养——动物细胞工程的基础
1.概念 指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
2.动物细胞培养的条件
动物细胞培养所需的基本条件
营养条件
其他条件
糖类、氨基酸、无机盐、维生素……
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
一、动物细胞培养——动物细胞工程的基础
2.动物细胞培养的条件
⑴营养
细胞在体外培养时,培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。其成分包括无机物:无机盐等;有机物:糖类、氨基酸、维生素、血清、血浆等。培养动物细胞一般使用液体培养基,也称为培养液。
⑵无菌、无毒的环境
无菌:①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理;
②在无菌环境下进行操作。
无毒:定期更换培养液,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
合成培养基中为什么要加入天然成分——血清?
血清中含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,可以补充合成培养基中缺乏的物质。
一、动物细胞培养——动物细胞工程的基础
2.动物细胞培养的条件
⑶温度、pH和渗透压
温度:哺乳动物多以(36.5±0.5)℃为宜。
pH:多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
渗透压:需要考虑的一个重要环境参数。
⑷气体环境
O2:细胞代谢所必需的
CO2:维持培养液的pH
95%空气和5%CO2的混合气体
一、动物细胞培养——动物细胞工程的基础
3.动物细胞培养的过程
⑴制备细胞悬液
①原因
从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖,这种现象称之为接触抑制。
②将动物组织分散成单个细胞的方法
用机械方法;用胰蛋白酶、