内容正文:
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(第2课时)
1
我们平常吃的东西里面包括了那些营养呢?
糖类
蛋白质
脂肪
淀粉
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
2
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖
还原糖+斐林试剂
砖红色沉淀
50~65℃水浴加热
反应实质:
还原糖将Cu2+还原,生成砖红色的Cu2O
1、还原糖:
(1)原理
3
1、还原糖:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖(教材P18)
(2)材料:苹果或梨匀浆
(3)试剂:斐林试剂(甲液和乙液混合均匀后使用,现配现用)
甜菜、甘蔗?
(4)显色反应:
无色 浅蓝 棕 砖红色沉淀
草莓?
马铃薯?
含糖量高,______________
白色或近于白色
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
4
2、蛋白质
(1)材料:豆浆、鲜肝研磨液
(2)试剂:双缩脲试剂
A:0.1g/mL的NaOH溶液
B:0.01g/ mL的CuSO4溶液
(4)现象:
紫色
现配现用,依次添加
在碱性条件下,肽键与双缩脲试剂中Cu2+作用,产生紫色络合物
(3)方法:
① 加入组织样液2mL,再加入双缩脲试剂A液1mL,摇匀;
② 加入双缩脲试剂B液4滴,摇匀;
无色 浅蓝 紫色
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
5
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
试剂 斐林试剂 双缩脲试剂
甲液 乙液 A液 B液
成分及
其浓度
鉴定物质
反应实质
添加顺序
反应条件
反应现象
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
6
试剂 斐林试剂 双缩脲试剂
甲液 乙液 A液 B液
成分及
其浓度 0.1 g/mL
NaOH 0.05 g/mL
CuSO4 0.1 g/mL
NaOH 0.01 g/mL
CuSO4
鉴定物质 还原糖 蛋白质
反应实质 还原糖将Cu2+还原,
生成砖红色的Cu2O 在碱性条件下,肽键与双缩脲试剂中Cu2+作用,产生紫色络合物
添加顺序 甲、乙等量混匀
立即使用 先加A液1 mL,摇匀;
再加B液4滴,摇匀
反应条件 50~65 ℃水浴加热 不需加热,摇匀即可
反应现象 浅蓝色→棕色→砖红色沉淀 紫色
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
7
3、脂肪的检测和观察
脂肪
苏丹Ⅲ染液
苏丹Ⅳ染液
橘黄色
红色
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
8
苏丹Ⅲ/
苏丹Ⅳ
滴1-2滴50%酒精
低倍镜
高倍镜
3、脂肪的检测和观察
3、脂肪的检测和观察
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
3、脂肪的检测和观察
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
脂肪会溶解在酒精中,使橘黄色消失。
注意:检测生物组织中的脂肪时,染色时间不宜过长的原因是?
11
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
鉴定物 试剂 试验条件 生成物颜色
还原糖
蛋白质
脂肪
淀粉
斐林试剂(0.1 g/mL氢氧化钠和0.05 g/mL硫酸铜)
双缩脲试剂(0.1 g/mL氢氧化钠和0.01 g/mL硫酸铜)
苏丹III染液
碘液
现配现用(等量的氢氧化钠和硫酸铜混合),50-60℃,水浴加热
先加A液(2ml),后加B液(3-4滴),常温
常温,染色后用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色,需要镜检
常温
砖红色沉淀
紫色
蓝色
苏丹IV染液
橘黄色
红色
三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
13
课堂小结
水
无机化合物
有机化合物
无机盐
糖类
脂质
蛋白质
核酸
细胞中的元素和化合物
组成细胞的元素
组成细胞的化合物
检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质
大量元素
微量元素
干重最多:c
鲜重最多:o
糖类:
脂质:
蛋白质:
淀粉:
斐林试剂,砖红色沉淀
(苏丹III:橘黄色 ,苏丹IV:红色)
(双缩脲试剂:紫色)
(碘液:变蓝)
14
Lavf58.20.100
Bilibili VXCode Swarm Transcoder r0.2.61(gap_fixed:False)
$