内容正文:
第2节 动物细胞工程
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
【本节聚焦】
1.什么是动物细胞融合技术?
2.单克隆抗体是如何制备的?
在临床上有哪些应用?
[课前5分钟]P48-49,快速找答案。
1. 植物体细胞杂交 PK 动物细胞融合方法
2. 找几个名词:杂交瘤细胞、单克隆抗体、克隆化培养
[活动1]结合右侧实例,阅读P48,回答以下问题。
一、动物细胞融合技术
1.什么是动物细胞融合技术(概念)?
2.动物细胞融合的基本原理是什么?
3.人工诱导动物细胞融合的方法有哪些?
融合后细胞的类型及特点?
4.动物细胞融合的意义是什么?
5.动物细胞融合和植物体细胞杂交分别有哪些异同?
6.动物细胞融合的应用有哪些?
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
细胞膜具有一定的流动性
方法:PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等。
融合操作后形成A B AA AB BB ,杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
灭活病毒诱导细胞融合的原理
P48【相关信息】
1.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么?
2.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么?
用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
【注意】
1.植物原生质体融合无灭活病毒诱导。
2.动物细胞融合实质及完成的标志:
细胞核融合
4.动物细胞融合的意义是什么?
突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
至今,种间、属间、科间,甚至动植物之间融合都已获得了成功。
生物种类 细胞来源 成功年代
酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年
人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年
人—小鼠 纤维肉瘤细胞——畸胎瘤细胞 1978年
生物种间杂交想像图
5.动物细胞融合和植物体细胞杂交分别有哪些异同?
植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
处理的细胞
融合前处理的酶处理
诱导融合方法
结果
融合成功标志
意义
细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性
细胞膜具有一定的流动性
用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞
电融合法、离心法;PEG融合法、高Ca2