内容正文:
专题十一 生物技术实践
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实 验
要求
5-1 微生物的应用:
(1)微生物的分离和培养
(2)微生物数量的测定
(3)培养基对微生物的选择作用
(4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用
实践与探究能力
5-2 生物技术在食品加工以及其他方面的应用:
(1)从生物材料中提起某些特定的成分
(2)运用发酵加工食品的基本方法
(3)测定食品加工中可能产生的有害物质
(4)蛋白质的提取和分离
实验与探究能力
------------------------------------核心知识总结--------------------------------------------
一、果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作
果酒的制作
果醋的制作
腐乳的制作
泡菜的制作
菌种
酵母菌(真菌)
来源:果皮上野生型酵母菌
醋酸菌(细菌)
来源:食醋工厂或菌种保藏中心购买
毛霉等
来源:空气中的毛霉孢子
乳酸菌
来源:材料表面
原理
酵母菌在无氧的条件下将葡萄糖氧化成乙醇,而且当培养液中乙醇浓度为16%时,酵母菌死亡。
醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸。
糖源充足时。醋酸菌可以将糖分解为醋酸。
蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成肽和氨基酸,脂肪酶,将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
乳酸菌发酵产生乳酸。
温度
18-250C
30-350C
15-180C
18-200C
注意事项
1. 发酵瓶中要预留1/3的空间,让菌种大量繁殖。
2. 变酸的酒表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的。
1. 整个发酵过程必须保证氧气充足。
2. 由酒精发酵转为醋酸发酵需要提高温度并持续通入氧气。
1. 盐的作用:析水、防腐、调味。
2. 12%酒精的作用:防腐、调味。
3. 香辛料的作用:防腐、调味。
1. 亚硝酸盐的测定方法:比色法。
2. 泡菜坛内形成的菌膜是由于产膜酵母大量繁殖形成的。
二、微生物的实验室培养
1.培养基:
依据
种类
特点
应用
物理性质
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
半固体培养基
加凝固剂
观察微生物的运动、分类鉴定
固体培养基
微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏
化学成分
天然培养基
含化学成分不明的天然物质
工业生产
合成培养基
培养基成分明确或用一定化学物质配制
分类、鉴定
用途
选择培养基
添加某物质,抑制杂菌生长,促进所需微生物生长
培养分离出特定微生物
鉴别培养基
根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂
鉴别微生物
2.无菌技术:
项目
概念
常用方法
应用范围
消毒
用较为温和的物理或化学方法,杀死物体表面或内部的部分微生物
巴氏消毒法:70 ℃~75 ℃煮30 min或80 ℃煮15 min
牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体
煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min
日常食品、罐装食品
紫外线消毒法:紫外线照射30 min
接种室、接种箱、超净工作台
化学药物消毒法:用体积分数为70%~75%的乙醇、碘酒涂抹
用于皮肤、伤口、消毒,空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等
灭菌
用强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物,包括芽孢和孢子
灼烧灭菌法:酒精灯火焰灼烧
微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具等,接种过程中的试管口或瓶口等
干热灭菌法:干热灭菌箱160 ℃~170 ℃加热1~2 h
玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等能耐高温、需要保持干燥的物品
高压蒸汽灭菌法:高压蒸汽灭菌锅,100 kPa,121 ℃,维持15~30 min
培养基等
3.微生物的纯化方法:
方法
平板划线法
稀释涂布平板法
注意事项
①接种环的灼烧a.第一次划线前:杀死残留微生物,避免污染菌种;b.每次划线前:杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线末端c.划线结束后:杀死残留菌种,避免环境。 ②灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种
①稀释操作时:每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰1-2 cm处
②涂布平板时:a.涂布器用70%酒精浸泡,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃
目的
在培养基上形成由单个细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落
培养
平板冷凝后倒置培养,以防止皿盖上的水珠落入培养