1.2纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 课件-2021-2022学年高二下学期生物浙科版选择性必修3

第二节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 一、采用划线或涂布的接种方法能够实现对目标微生物的分离和纯化 1.单菌落分离 通过平板划线法和稀释涂布平板法等方法获得单菌落 意义：单菌落的分离是消除杂菌污染的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一. 单菌落：在固体培养基上通过接种、培养获得的由一个细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团。 平板划线法 第1区划线 接种环灭菌 第2区划线 接种环灭菌 第3区划线 接种环灭菌 接种环灭菌 1 2 3 4 5 分区划线法 思考：若完成图示操作，共做了五次划线，接种环灼烧灭菌了几次？ 连续划线法 用接种环蘸菌液____次，在固体培养基表面划线，下一次划线应从上一次划线的______开始。每次划线前接种环要 ，聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养，可以在划线的末端出现不连续的 。若共划线五次，接种环要烧灼____次。另外：每次划线都不能与之前的线条_____；不能将最后一次划线与第一次划线相连；不能_____培养基。培养基需 后，放入培养箱培养。 划破 重叠 6 末端 1 例题 灭菌 单菌落 倒置 注意：1.无论是何种划线法，蘸取菌种前和划线后，接种环都要灼烧灭菌。 2.无论是何种划线法，菌种只蘸取一次。 【注意事项】 ⑴接种环的灼烧： a.第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物。 b.每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端。 c.划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者。 ⑷划线用力要大小适当，防止用力过大划破培养基。 ⑵灼烧接种之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种。 ⑶划线时最后一区域不要与第一区域相连。 a.一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； b.存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 每次实验：划3个平板（重复实验）1个不接种（空白对照） 1.在未接种的培养基表面是否有菌落生长?如果有，说明了什么? 提示：未接种的培养基是不能有菌生长的,如果有菌生,长则说明受到污染或者灭菌不彻底. 2.如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗? 原因：接种的菌