内容正文:
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
三 动物体细胞核移植技术和克隆动物
【学习目标】
1.简述动物细胞融合技术的过程,认识到动物细胞融合技术的意义——科学思维
2.掌握单克隆抗体的制备过程,举例说明单克隆抗体技术在医学上的应用——科学思维、社会责任
3.掌握动物体细胞核移植技术的基本过程——科学思维
4.分析体细胞核移植技术的应用前景和面临的问题——社会责任
知识点一 动物细胞融合技术
[新知梳理]
1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2.结果:形成杂交细胞,且具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
3.诱导方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
4.意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
5.应用:
(1)是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)杂交瘤技术为制备单克隆抗体开辟了新途径。
[互动探究]
1.动物细胞融合的原理是什么?
提示:细胞膜的流动性。
2.结合植物体细胞杂交的过程,思考在动物细胞融合和实际操作过程中,是只用单个的两种细胞来融合吗?
提示:不是,是把多个两种细胞放在一起,让它们融合。
3.融合处理后的细胞是否可以直接用于培养?为什么?
提示:不可以,还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合,但不能保证所有的细胞都发生融合,形成的融合细胞也有多种,因此需要筛选。
4.若只考虑细胞间的两两融合,诱导后形成的融合细胞有几种?
提示:有三种。即同种细胞融合(两种)和不同细胞融合(一种)。
[归纳总结]
1.融合的原理与过程
(1)原理:细胞膜的流动性。
(2)过程:动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性,细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。如下图(以灭活的病毒诱导为例):
2.融合的结果
形成单核杂交细胞,具有原来两个或多个细胞的遗传信息,可表现出两个或多个亲本的特点。
3.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、细胞的全能性
细胞膜的流动性、细胞的增殖
融合前
处理
先除去细胞壁
先使细胞分散开
使用的酶
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
诱导手段
物理法:电融合法、离心法
化学法:PEG融合法、高Ca+—高pH 融合法
PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法
续表
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
过程
结果
杂种植株
杂交细胞
应用
培育植物新品种
主要用于制备单克隆抗体
意义
克服了远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合
[题组通关]
1.关于动物细胞融合的说法,不正确的是( )
A.动物细胞融合是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞
C.常用的诱导动物细胞的方法有:PEG融合法、灭活病毒诱导法、紫外线照射法
D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能
解析 动物细胞融合常用的诱导因素有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,紫外线照射不能诱导细胞融合。
答案 C
2.下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交技术的说法正确的是( )
A.基本原理相同
B.诱导细胞融合的方法相同
C.细胞融合前的处理过程相同
D.融合后都需要进行筛选
解析 植物体细胞杂交的原理为细胞膜的流动性、植物细胞的全能性,而动物细胞融合利用的是细胞膜的流动性和细胞增殖;动物细胞融合常用灭活的病毒诱导,而植物体细胞杂交不能;动物细胞融合前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开,植物体细胞杂交常用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁;诱导融合后会形成多种融合细胞,还有未融合细胞,因此要进行筛选。
答案 D
知识点二 单克隆抗体及其应用
[新知梳理]
1.传统抗体的获得
(1)方法:
―→
(2)缺点:产量低、纯度低、特异性差。
2.单克隆抗体的制备及优点
(1)制备原理:
①B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
②骨髓瘤细胞特点:能在体外大量增殖。
③杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。
(2)制备过程:
3.单克隆抗体的应用
(1)作诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原体的鉴定中发挥重要作用。
(2)用于运载药物和治疗疾病。
[互动探究]
1.为什么要对小鼠注射特定的抗原?
提示:以获得能产生相应抗体的B淋巴细胞。
2.试思考制备单克隆抗体时,不直接用经过免疫的B淋巴细胞来获得单克隆抗体的原因是什么?
提示:用于获得杂交瘤细胞的B淋巴细胞为浆细胞