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选择性必修三 生物技术与工程
教材课后练习题讲评(第3章)
1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是( )
A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氨键
B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段,重新形成磷酸二酯键
D.只能连接双链DNA片段互补的黏性末端,不能连接双链DNA片段的平末端
一、概念检测
C
3.1 重组DNA技术的基本工具(练习与应用(P74)
2.在重组DNA技术中,将外源基因送入受体细胞的载体可以是( )
A.大肠杆菌的质粒
B.切割DNA分子的酶
C. DNA片段的黏性末端
D.用来识别特定基因的DNA探针
一、概念检测
A
二.拓展应用
1.想一想,为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分了?
迄今为止,在基因工程操作中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的,它们可以识别DNA上特定的碱基序列并使特定部位的磷酸二酯键断开。微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,可以将外源入侵的DNA降解。细菌中限制酶之所以不切割自身的DNA,是因为含有某种限制酶的细胞的DNA分子或者不具备这种限制酶的识别序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。这样,尽管细菌中含有某种限制酶,也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA入侵。
有2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶切speⅠ进行切割,B片段分别用限制酶HindⅢ , XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。
(1)哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶Spel切割A片段产生的DNA片段相连接?为什么?
xbaⅠ。
因为XbaⅠ与Spe Ⅰ切割产生了相同的黏性末端
二.拓展应用
(2)不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端,这在基因工程操作中有什么意义?
识别DNA分子中不同核苷酸序列,但能切割产生相同黏性末端的限制酶被称为同尾酶。同尾酶使构建载体时,切割位点的选择范围扩大。例如,,我们选择了用某种限制酶切割载体,如果目的基因的核苷酸序列中恰好含有该限制酶的识别序列,那么用该限制酶切割含有目的