内容正文:
专题16 基因工程与细胞工程
[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.植物的组织培养(Ⅱ)。6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
[思维导图]
答案:①DNA连接酶 ②基因表达载体的构建 ③将目的基因导入受体细胞 ④药物 ⑤基因 ⑥自然界中没有 ⑦全能性 ⑧体细胞杂交 ⑨细胞增殖 ⑩动物细胞核 ⑪化学法 ⑫抗原
高考命题36 基因工程
[核心知识]
1.目的基因的获取途径
方法
具体操作
直接分离
从自然界已有的物种中分离,如从________中获取
人工合成
化学
合成
已知核苷酸序列的________基因,直接利用________用化学方法合成,不需要模板
逆转
录法
以RNA为模板,在________的作用下人工合成
PCR技
术扩增
目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在________作用下延伸
2.基因表达载体的构建——重组质粒的构建
(1)表达载体的组成:目的基因+________+________+标记基因+复制原点。
(2)启动子和终止子:启动子是________结合位点,启动转录;终止子是________的位点。
3.将目的基因导入受体细胞
项目
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用
方法
________法、基因枪法、________法
________技术
________
法(用Ca2+处理)
受体
细胞
受精卵、体细胞
________
原核细胞
4.目的基因的检测与鉴定
(1)导入检测:______________技术(使用DNA探针)。
(2)表达检测
(3)个体生物学水平鉴定:如对转基因作物进行________等接种实验。
答案:1.基因文库 较小 DNA合成仪 逆转录酶 DNA聚合酶
2.(1)启动子 终止子 (2)RNA聚合酶 终止转录
3.农杆菌转化 花粉管通道 显微注射 感受态细胞 受精卵
4.(1)DNA分子杂交 (2)mRNA 抗原—抗体杂交 (3)抗虫或抗病
[易错判断]
(1)启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 ( )
(2)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选,必须通过分子检测( )
(3)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸( )
(4)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,属于基因工程( )
(5)构建人胰岛素基因表达载体,表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点( )
(6)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子中脱氧核糖和磷酸交替连接( )
(7)应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达( )
(8)动物的生长激素基因转入植物后不能表达( )
(9)从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽( )
(10)采用蛋白质工程进一步改造AFB1解毒酶的基本途径是从提高酶的活性出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列( )
答案:(1)× (2)× (3)× (4)× (5)× (6)× (7)× (8)× (9)√ (10)√
调研1 基因工程
1.(2021·河北单科)采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉(Cd)在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内,进行后续处理(例如,收集植物组织器官异地妥善储存),可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力,研究者将酵母液泡Cd转运蛋白(YCF1)基因导入受试植物,并检测了相关指标。回答下列问题:
(1)为获取YCF1基因,将酵母细胞全部DNA提取、切割后与载体连接,导入受体菌的群体中储存,这个群体称为________。
(2)将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,所需要的两种酶是____________________。构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因,其作用是_______________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)进行前期研究时,将含有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜,采用最多的方法是____________。研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系,