内容正文:
第二节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得
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[学习目标]
1.概述分离和纯化微生物的平板划线法和稀释涂布平板法。
2.举例说明通过调整培养基的配方,可有目的地培养某种微生物。
3.概述测定微生物数量的稀释涂布平板法和显微镜计数法。
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必备知识 自主学习
核心要点 合作探究
课堂检测 素养达标
课时作业 巩固演练
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[教材导读]
一、采用划线或涂布的接种方法能够实现对目标微生物的分离和纯化
1.接种
(1)定义:接种是指微生物进入 的过程。
(2)类型: 接种和 接种。
2.单菌落
在 培养基上采用 或 的方法接种,通过培养能获得由 细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的______
_______,这样的细胞集团称为单菌落。
培养基质
自然
人为
固体
划线
稀释涂布
一个
子细
胞集团
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3.平板划线
(1)连续平行划线是从培养基上的 出发,向左右连续划 至覆盖整个培养基表面。(如图A)
A.连续平行划线
一点
平行线
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(2)扇形划线是从培养基上的一点出发,向多方向多次划线。每划一条线都要将接种环在 上灭菌,然后再次从 变换方向划线。(如图B)
B.扇形划线
酒精灯的火焰
同一起点
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(3)多次连续平行划线接种时,划线可分 进行。将培养皿旋转一定角度后,不需再次 ,只需在上一次划线的 直接开始划线即可。(如图C)
C.多次连续平行划线
3~4次
蘸取菌种
末端区域
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4.稀释涂布平板法
稀释涂布平板法接种时,通常需要先将菌液进行 ,并在培养皿侧面或底面做好标记后,将稀释度不同的菌液各取0.1 mL,加在____培养基表面,然后用 将菌液均匀地涂布在 进行培养。
梯度稀释
固体
涂布器
培养基表面上
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5.活动:接种、培养并分离酵母菌
(1)目的要求
①用 或 接种酵母菌。
②用 大量扩增酵母菌。
(2)方法步骤
制作平板→ (用平板划线法接种、用稀释涂布平板法接种、将菌种接种到液体培养基中)→ →观察培养结果→挑取菌落利用划线法接种至 培养基中。
平板划线法
稀释涂布平板法
液体培养基
接种
培养
试管斜面
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二、稀释涂布平板法和显微镜计数法可测定微生物的数量
1.测定微生物数量的目的:了解目标微生物的 。
2.稀释涂布平板法
(1)问题:平板上的菌落即使是分开的,也可能难以数清其数量。如果菌落太多,准确数出菌落数并不容易,这会导致最终的计算结果出现
。而菌液稀释度过大,菌落数少,虽然容易准确计数菌落数,但可能存在较大的 。
繁殖速度
较大误差
随机误差
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(2)解决方法:一是在保证能准确计数的前提下 稀释度;二是将______稀释度下的多组数值取 后再进行计算。即:每毫升菌液中微生物细胞的数量=某一稀释倍数下至少 培养皿的 ÷菌液稀释液体积× 。
减小
相同
平均值
3个
平均菌落数
稀释倍数
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3.显微镜计数法
(1)血细胞计数板
①侧面观:
1. 2.