内容正文:
第2节 动物细胞工程
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
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1.单克隆抗体的制备和过程。
2.概述单克隆抗体的制备,举例说出诱导动物细胞融合的方法
3.认同单克隆抗体在临床上具有重要应用价值。
学习目标
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阅读P48—49页,回答下列问题
2、单克隆抗体是如何制备的?在临床上有哪些应用?
1、什么是动物细胞融合技术?
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(一)动物细胞融合
1.概念
动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.诱导原理:__________________________。
3.诱导结果:形成_______________细胞。
4.诱导方法:_____________法、电融合法和___________________法等。
细胞膜的流动性
杂交
PEG融合
灭活病毒诱导
灭活:指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染力,但并不破坏他们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是:病毒表面含有的糖蛋白和发生作用,使细胞相互凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
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(6)过程:动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性,细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。
绿色荧光燃料标记的膜蛋白
红色荧光燃料标记的膜蛋白
人体细胞
鼠细胞
细胞融合
杂交细胞
杂交细胞
370C、40min
细胞质融合
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7.动物细胞融合技术的应用
(1)成为研究_________________、__________________、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制备_____________________。
8.意义:突破了___________________的局限,使____________________成为可能。
细胞遗传
细胞免疫
单克隆抗体
9.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
有性杂交
远缘杂交
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比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
融合前处理
使用的酶
诱导手段
细胞膜的流动性、
细胞的全能性
细胞膜的流动性、
细胞的增殖
先除去细胞壁
先使细胞分散开
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
物理法:电融合法、离心法
化学法:PEG融合法
除物