1.2.1 微生物的基本培养技术（备课件）-【上好课】2021-2022学年高二生物同步备课系列（人教版2019选择性必修3）

第一章 发酵工程 第2.1节 微生物的基本培养技术 学习目标 了解有关培养基的基础知识。 （科学思维） 01 02 掌握培养基的配制、无菌技术及微生物的纯培养（科学思维、科学探究） 首先酸奶制作所用的容器要进行消毒晾干后使用，避免酸奶制作过程中混入杂菌； 其次，准备好菌种，最好是纯的乳酸菌菌种； 再有就是接种时要在无菌条件下操作，所用搅拌器要经过消毒灭菌等。 从社会中来 在经过杀菌处理的牛奶中添加某些 对人体有益的细菌，再经过发酵就可 以制成酸奶。由于制作工艺并不复杂， 一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶 虽然方便，但是食用自制酸奶导致胃肠不适的事例屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？ 回顾旧知 微生物 概念：个体无法用肉眼观察的微小生物 分类： 真核细胞 原核细胞 无细胞结构 细菌:蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等； 放线菌：链霉菌等 RNA病毒:SARS病毒、新冠病毒等； DNA病毒；噬菌体等 真菌:酵母菌、毛霉等； 原生生物:草履虫、变形虫等 新课讲授 1 一、微生物的基本培养技术 ①要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件； ②要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。 1._____________________________________是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物 2.在实验室培养微生物的要求: 培养基的配制 1.培养基的概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基，用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 2.培养基的分类：按照物理性质不同分为两类。 培养基种类 特点 液体培养基 不含凝固剂（如琼脂），呈液体状态 固体培养基 含凝固剂（如琼脂），呈固体状态 注意说明 1.加入培养基中的凝固剂（如琼脂），一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。 2.微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落 3.扩大培养获得大量菌种时，常用液体培养基。 一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体 3.营养组成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 碳源、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10 g 氮源和维生素等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1000 mL 水 1000 mL 牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 4.培养基的特殊需求：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧条件。 注意说明 关于微生物培养基中营养物质的三个注意点： （1）培养不同微生物所需要的营养物质可能不同：①自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。②异养型微生物的培养基主要以有机营养为主。 （2）培养某些微生物时需要补充生长因子，是由于这些微生物缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。 （3）微生物所需营养物质中，需要量最大的是碳源。能合成含碳有机物的是自养型，反之则为异养型。 新课讲授 2 二、无菌技术 1.获得纯净的微生物培养物的关键是______________。 防止杂菌污染 ①消毒：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 ②灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 2.防止杂菌污染的方法： 芽孢和孢子的区别： 芽孢是某些细菌（芽孢杆菌属、梭状芽孢杆菌属、芽孢乳酸菌属等）在营养条件缺乏时，在菌体内形成的一个圆形或椭圆形、含水量低、抗逆性强的休眠体； 孢子是脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞，它是有丝分裂或减数分裂的产物。 3.无菌的范围： ①实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒 ②培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 ③实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 注意：为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。 资料卡 常用的消毒和灭菌方法 常用的消毒方法 ①煮沸消毒：100℃煮沸5-6 min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。 ②巴氏消毒：62-65℃下煮30 min或80-90℃处理30s-1min，适合不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。 ③化学药剂消毒：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源等。 ④紫外线消毒：接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30