第3章 第2节 基因工程的基本操作程序（讲义）-【状元桥·优质课堂】2021-2022学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019）

典例透析 1.解析(1)“苯酚和氯仿不溶或微溶于水,它们的密度均大于 第2节基因工程的基本操作程序 水”,而DNA能够溶于水,故离心后获得的上清液中含有必备知识·自清自查 DNA,由此可推知,步骤③、④所依据的原理是DNA不溶知识点1 于苯酚、氯仿,而蛋白质等杂质溶于苯酚、氯仿。(2)DNA1.目的基因基因表达载体受体细胞检测与鉴定 不溶于酒精溶液,但是鈿胞中的某些蛋白质则溶于酒精。:2.受体细胞性状预期表达产物 步骤⑤加入2~3倍体积的95%乙醇能够使DNA析出,同:3.(1)已知结构和功能清晰Bt基因(2)①半保留复制 时去除部分蛋白质等杂质。(3)DNA鉴定需要沸水浴加 热,并且鉴定过程中需要设置对照实验。(4)分析表格可 各种组分大量复制②DNA模板引物耐高温的 知,形成层、冬芽、秋梢嫩叶的DNA含量较高,而韧皮部 DNA聚合酶温度③90解聚为单链50碱基互补 成熟叶片的DNA含量较低,从细胞分裂的角度来看,形成 配对72耐高温的DNA聚合酶④PCR扩增仪(PCR 层、冬芽、秋梢嫩叶等部位的细胞分裂旺盛,DNA复制使得 仪)琼脂糖凝胶电泳(3)基因文库 胞中DNA含量较高 微练 (1)DNA不溶于苯酚氯仿,而蛋白质等杂质溶于苯1.提示(1)PR过程中不需要解旋酶,DNA变性是依靠高温 酚、氯仿(2)使DNA析出,同时去除部分蛋白质等杂质 90℃以上)使得DNA解聚为单链 (或提取含杂质较少的DNA)(3)水浴条件应为“沸水浴” (2)引物是一段与DNA母链的一段碱基序列互补配对的 缺少对照组(4)形成层、冬芽、秋梢嫩叶等部位的细胞分:短单链核酸,引物的作用在于可让脱氧核苷酸连接在上面, 裂旺盛,DNA复制使得细胞中DNA含量较高 从而开启子锤的延伸。 2.C解析图1所示操作为析出DNA,溶液a是研磨液过滤:2.提示(1)×目的基因未必都具有抗逆性。 静置后得到的上清液,不是NaCl溶液,A错误;加入冷的 酒精的目的是析出DNA、去除溶于酒精的蛋白质等杂质 (3)×PCR扩增时,当温度下降到50℃左右时,引物与 原理是DNA不溶于酒精,而蛋白质等杂质能溶于酒精 B错误;图2所示操作中的错误是试管中的液面高于水浴 模板链特定部位结合。 (4)√ 的液面,导致试管受热不均匀,C正确;图2中试管1的作 知识点2 用是作为对照,排除NaC溶液对实验结果的干扰,D错误。1.(1)启动子(2)受体细胞(3)①上游RNA聚合酶 随堂演练·巩固基础 1.D解析两种酶都可以连接黏性末端,只有T4DNA连接 ②下游终止转录(4)①载体②同种能产生相同末 端目的基因③DNA连接酶切口 酶可以连接平末端,A错误,D正确;两种DNA连接酶都2.(1)①花粉管通道微量注射器子房花粉管通道②农 只能连接磷酸二酯键,而不能连接DNA双链间的氢键, B、C错误 杆菌转化花序种子(2)显微注射法(3)Ca2+ DNA分子 2.A解析作为载体需能在宿主细胞内稳定保存大量复制,:3.(1)PCR转录出了mRNA蛋白质抗原一抗体杂交 记基因,以便于重组DNA的鉴定和选择,C错误;应对宿主 (2)抗虫 细胞无伤害,以便目的基因能够与其结合,D错误, 微练 3.C解析工具酶(限制酶和DNA连接酶)和载体的发现使:1.提示(1)游离的DNA片段进入受体细胞,一般会直接被分 基因工程的实施成为可能,A正确;限制酶能识别双链 解,就算可以进行转录并翻译成蛋白质,游离的DNA片段 DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并使每一条链中特定 也无法随着细胞分裂而进行复制,导致子代细胞中不再含 部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,B正确;DNA 有目的基因。若将目的基因插入载体,由于载体可以在细 连接酶能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二 胞内复制,随着细胞分裂,载体会带着目的基因存在于每个 酯键连接起来,C错误;质粒上的抗性基因常作为标记基因 子代细胞中。这样,基因工程才有意义。 可供重组DNA的鉴定和选择,以确定重组质粒是否导入 2)A一启动子,B一终止子,C一标记基因;目的基因将嵌 宿主细胞,D正确 入A与B之间被限制酶切割后的切口处。 4.A解析哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体:2.提示(1)×外源DNA必须位于启动子与终止子之间才 等,DNA含量少,不宜作为该实验的材料,A错误;在 能“表达”。 2molL的NaCl溶液中,DNA的溶解度较大,进而可去除 (2)×基因表达载体中有启动子、终止子而无起始密码与 不溶的杂质,B正确;DNA不溶于酒精但某些蛋白质溶于:终止密码。 酒精,向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数为95%的 (3)√(4)√ 酒精溶液,有利于获得较纯净的DNA,C正确;DNA与 胺试剂在沸水浴下反应呈蓝色,D正确 (5)×基因表达包括转