内容正文:
第3章 基因工程
考点一 基因工程的概念及基本操作工具
考点二 基因工程的基本操作程序
考点三 基因工程的应用
考点四 蛋白质工程
项 目 具体内容
操作对象 基因
原 理 _________
操作环境
操作水平 _________
结 果 获得_____________的新的生物类型和生物产品
优 点 克服_______________的障碍;_________生物性状
基因重组
分子水平
符合人们需要
远缘杂交不亲和
定向改造
一、基因工程的概念
生物体外
1.限制性内切核酸酶
——“分子手术刀”
2.DNA连接酶
——“分子缝合针”
3.基因进入受体细胞的载体
——“分子运输车”
1.DNA重组技术的基本工具
限制性核酸内切酶
a.识别序列:
b.切割位点:
c.切割的化学键:
d.切割产物:
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限制酶所识别的序列有什么特点?
黏性末端
黏性末端
EcoRI限制酶的切割
只能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。
6
6
平末端 平末端
SmaI限制酶的切割
只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开
1.被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?
具有
不一定,但一般具有不同的黏性末端
2.被不同的限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?
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限制酶A识别:
-ATGATCAT-
-TACTAGTA- ,切割位点是T与G之间;
限制酶B识别:
-CAGATCTG-
-GTCTAGAC- ,切割位点是A与G之间
那么,它们产生的粘性末端就相同,
都是: GATC —
举例:
课后练习
课本,P75,拓展-2
(2)DNA连接酶
作用:将两个DNA片段连接起来。
常用类型
来源 _________
功能 只缝合________ 缝合________________
结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的__________
大肠杆菌
黏性末端
黏性末端和平末端
磷酸二酯键
E·coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
T4噬菌体
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
DNA连接酶 DNA聚合酶
相同点 作用实质
化学本质
不
同
点 模板
作用对象
作用结果
用途
都能催化形成磷酸二酯键
都是蛋白质
不需要
需要DN