内容正文:
动物细胞工程和胚胎工程
动物细胞工程
动物细胞培养(基础)
动物细胞融合
动物细胞核移植
动物细胞工程
1.动物细胞培养
动物细胞培养的条件
营养条件
其他条件
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
血清
1.动物细胞培养
36.5±0.5℃
7.2-7.4
95%空气和5%CO2
血清
二氧化碳培养箱
细胞培养瓶
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液原代培养
分瓶
传代培养
动物胚胎、幼龄动物
机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理将组织分散成单个细胞
用培养液将细胞制成细胞悬液
一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
直接用离心法收集
重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集
思考
1.用胰蛋白酶分散细胞,可以说明什么问题?
2.可以用胃蛋白酶处理吗?为什么?
3.酶解法较温和,一定不会对动物细胞造成损伤,对吗?
4.需分瓶进行传代培养的原因 ;
5.为什么培养液需要定期更换?
6.如何防止培养过程中的微生物污染?
思考
原代培养与传代培养的定义?
细胞贴壁?
接触抑制?
接触抑制
思考
两类细胞的生长特点
①悬浮生长类________________________________
②贴壁生长类
___________________________________
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻
除受密度、有害代谢物、营养物质影响外,还会发生接触抑制
知识总结
植物组织培养 动物细胞培养
原理
培养前处理
取材
培养基的物理性质
培养基的成分
特有成分
植物细胞的全能性
细胞增殖
离体
用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开
离体植物器官、组织、细胞
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
固体
液体(又称培养液)
有机营养成分
无机营养成分
植物激素
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质及一些天然成分如血清
植物激素
血清
植物组织培养 动物细胞培养
特殊环境条件
结果
是否体现细胞的全能性
过程
相同点
再分化需光
气体环境
一般获得新的植株
获得大量细胞
是
否
1.培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;
2.均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条