内容正文:
专题十五 遗传的分子基础链
菌体表面
菌落表面
致病性
S型细菌
有多糖荚膜
光滑
使人和小鼠患肺炎,小鼠并发败血症死亡
R型细菌
无多糖荚膜
粗糙
无致病性
一、肺炎链球菌转化实验
S型细菌的荚膜,可以抵抗吞噬细胞的吞噬,因此能在宿主体内生存。
1、肺炎链球菌的体内转化实验(研究者:格里菲思)
结论:加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活菌转化为S型活细菌的活性物质——转化因子。
2、肺炎链球菌的体外转化实验(研究者:艾弗里)
注意:①艾弗里使用的细菌提取物是加热杀死的S型细菌,破碎细胞后去除了大部分糖类、蛋白质和脂质后剩余的物质。该提取物中还含有DNA、少量RNA以及微量的蛋白质和脂质。
②第二至四组实验分别加入不同酶,其中酯酶是三丁酰甘油酯酯酶,而不是磷脂酶或脂肪酶。
结论:DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。
★易错易混
①格里菲思的实验只能证明加热杀死的S型细菌中含有某种转化因子,不能证明DNA是遗传物质。艾弗里则证明了转化因子是S型细菌的DNA,即DNA是遗传物质。
②加热杀死的S型细菌,其蛋白质变性失活(不可逆),但DNA在加热过程中,双螺旋解开,氢键被打断,但缓慢冷却时,其结构可恢复。(断氢键,可恢复)
③R型细菌转化为S型细菌的实质:基因重组(可遗传变异)
④转化过程中并不是所有的R型细菌都被转化成S型细菌,而只是少部分R型细菌转化成S型细菌。
⑤艾弗里证明DNA是遗传物质的实验中,每个实验组都通过添加特定的酶特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质,这利用了自变量控制中的“减法原理”。(教材46页)
3、肺炎链球菌体内转化实验与体外转化实验的比较
二、噬菌体侵染细菌的实验
1、科学家:赫尔希和蔡斯
2、实验材料:T2噬菌体和大肠杆菌
①T2噬菌体的结构:60%是蛋白质(含有特征元素S),40%
是DNA(含有特征元素P)。
②T2噬菌体的生活方式:专门寄生在大肠杆菌体内(不能用
培养基直接培养病毒,只能用活细胞培养)
③T2噬菌体的增殖过程:吸附→注入→合成→组装→释放
④T2噬菌体的增殖条件
增殖需要的条件
内容
模板
T2噬菌体的DNA
合成T2噬菌体DNA的原料
大肠杆菌提供的四种脱氧核苷酸
合成T2噬菌体的蛋白质
原料
大肠杆菌的氨基酸
场所
大肠杆菌的核糖体
3、研究思路:将DNA和蛋白质分开,直接地单独地去观察它们各自的作用。
4、实验方法:放射性同位素标记法
(注意:①不能用DNA和蛋白质的共有元素14C、3H等进行标记;②不能用35S和32P标记同一个噬菌体,否则不能确定是何种元素的放射性。)
5、实验过程
(1)标记噬菌体
(2)噬菌体侵染细菌
(3)搅拌的目的:使吸附在大肠杆菌上的噬菌体与其分离
离心的目的:让上清液中析出质量较轻的T2噬菌体颗粒,
沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌。(噬菌体与细菌分层)
(4)实验结果:
(5)结论:子代噬菌体的各种性状,是通过亲代的DNA遗传
的。DNA才是噬菌体的遗传物质。
该实验可同时证明:①DNA分子具有相对稳定性。②DNA能自我复制,使前后代保持一定的连续性。③DNA能控制蛋白质的生物合成。
(6)实验误差分析
用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中也含少量放射性。
①保温时间过短,有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌
细胞内,经离心后分布于上清液中,上清液中出现放射性。
②噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离,这一段保
温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代。经离
心后分布于上清液,也会使上清液中出现放射性。
用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,沉淀物中也具一定放射性。
①若用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,理论上沉淀物中不
含放射性,但可能由于搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体
蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中,沉
淀物中出现很低的放射性。
6、艾弗里实验和赫尔希、蔡斯实验的比较S
噬菌体
32P、35S
31P、32S
14C、3H
12C、1H
宿主细胞
31P、32S
32P、35S
12C、1H
14C、3H
子代病毒
32P、32S
32P、35S
14C-DNA 1H-蛋白
3H-DNA 12C -蛋白
14C-DNA 3H-DNA
14C-蛋白 3H-蛋白
(7)放射性元素的标记总结
三、RNA是遗传物质的证据:烟草花叶病毒侵染实验
1、烟草花叶病毒
2、烟草花叶病毒侵染实验
对照组:用烟草花叶病毒感染正常烟草,烟草产生花叶病。
结论:烟草花叶病毒的遗传物质是RNA