第1章 第2节 一 微生物的基本培养技术-【高考领航】2021-2022学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程同步核心辅导与测评教师用书（人教版）

第2节　微生物的培养技术及应用 一　微生物的基本培养技术 [目标领航]　1.培养基的概念、分类、组成功能及如何配制培养基。2.掌握无菌技术知识及无菌技术的操作。3.掌握以酵母菌为实验材料进行平面培养和纯化。 培养基的配制 1．培养基的概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．种类 (1)按物理性质 ①液体培养基：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。呈液体状态，不含凝固剂(如琼脂)。 ②固体培养基：在液体培养基中加入琼脂后制成的琼脂固体培养基，是实验室最常用的培养基之一，微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，形成肉眼可见的菌落。 (2)按化学成分分：天然培养基、合成培养基。 (3)按用途分：选择培养基、鉴别培养基。 3．营养成分 水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及O2的需求。 例如，培养乳酸杆菌的培养基需要添加维生素；培养霉菌需要将培养基调至酸性；培养细菌需要将培养基调至中性或弱碱性；培养厌氧微生物需要提供无氧的条件。 无菌技术 1．无菌技术的目的 获得纯净微生物培养物，防止外来杂菌污染。 2．主要内容：包括消毒和灭菌。 (1)对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)做好消毒和灭菌工作后，要注意应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 (4)为了避免周围环境中微生物的污染，实验操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。 3．消毒与灭菌 项目 消　毒 灭　菌 概念 使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的一部分微生物(不包括芽孢和孢子) 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 常用 方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法等 湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌 适用 对象 操作空间、操作者的衣着和手等 微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 微生物的纯培养 1．培养物与纯培养物 (1)培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成含特定种类的微生物的群体称为培养物。 (2)纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 2．微生物的纯培养步骤 包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养。 3．酵母菌的纯培养 (1)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。 (2)获得单菌落的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。 (正确的打“√”，错误的打“×”) 1．任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐。(×) 2．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产。(×) 3．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响。(√) 4．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性。(×) 5．灭菌是指杀灭物体内外一切微生物，包括芽孢和孢子。(√) 6．实验者的双手用酒精消毒。(√) 7．接种环用灼烧法灭菌。(√) 8．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线照射等。(×) 9．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板。(√) 10．待平板冷却凝固将平板倒过来放置。(√) 11．获得纯净微生物培养物的关键是防止外来杂菌污染。(√) 12．由单一个体细菌所获得的微生物群体称为纯培养。(×) 知识点一　培养基的配制 1．培养基的种类 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体 培养基 加凝固剂，如琼脂 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 化学 成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴别 用途 选择培养基 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长 培养、分离出特定微生物，如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈黑色，并带有金属光泽) 2.培养基的成分 营养物质 定义 作用 主要来源 碳源 凡能提供碳元素的物质 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质 无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 氮源 凡能提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸