内容正文:
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二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
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[目标领航] 1.掌握动物细胞融合技术。2.简述单克隆抗体的制备过程以及在临床上的应用。
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基础
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两个或多个
一个细胞
细胞膜的流动性
如电融合法
PEG
灭活的病毒诱导
有性杂交
远缘杂交
动物细胞融合技术
1.动物细胞融合技术的概念:使___________动物细胞结合形成___________的技术。
2.原理: __________________________。
3.诱导细胞融合的三种方法
(1)物理法: ___________。
(2)化学法:如___________(聚乙二醇)融合法。
(3)生物法:如_______________________法。
4.意义:突破了___________方法的局限,使___________成为可能。
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单克隆抗体的制备过程
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单克隆抗体及其应用
1.传统获得抗体
(1)方法:①向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体;②从动物血清中分离所需抗体。
(2)特点:产量低、纯度低、特异性差。
(3)存在的问题:①每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,要获得大量的单一抗体必须克隆单一的B淋巴细胞,但一个B淋巴细胞不能无限增殖;②骨髓瘤细胞能无限增殖但不能产生抗体;③解决思路是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞。
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2.单克隆抗体的特点及应用
(1)单克隆抗体的特点:能准确识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合,并可大量制备。
(2)单克隆抗体的应用:①广泛用作诊断试剂,在多种疾病和病原体鉴定中发挥重要作用;②单克隆抗体用于治疗某些疾病。
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√
×
×
×
×
(正确的打“√”,错误的打“×”)
1.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。( )
2.跟植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒。( )
3.动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。( )
4.单克隆抗体的制备首先要从小鼠体内提取B淋巴细胞。( )
5.单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。( )
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√
√
√
6.动物细胞融合时,先是细胞膜发生融合,然后是细胞核的融合。( )
7.融合形成的杂交细胞具有两个细胞的遗传特性,通过动物细胞培养,杂交细胞能表现出两个亲本的性状。( )
8.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。( )
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重难
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知识点一 动物细胞融合技术
1.过程(以灭活的病毒诱导融合为例)
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细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合,其中细胞膜的融合是细胞融合的先导,没有细胞膜的融合就不会有细胞质和细胞核的融合。
[特别提醒] 动物细胞融合的实质及结束的标志都是细胞核融合。
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2.结果
融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,即杂交细胞。通过动物细胞培养,杂交细胞可表现出两个(或多个)亲本的特点。
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3.优点与应用
(1)优点
突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。目前,种间、属间、科间,甚至动物与植物之间的细胞融合已经获得了成功。
(2)应用
①细胞融合技术是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。②利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。
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(1)为什么灭活的病毒能作为诱导因素,而不灭活的病毒不能作为诱导因素?
①灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。把两个动物细胞放在一起,用灭活的病毒处理后