内容正文:
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养 eq \a\vs4\al(►►)见学生用书P013
学习目标
重点难点
1.知识目标
了解有关培养基的基础知识;掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
2.能力目标
分析实验思路的确定和形成的原因,分析实验流程,对比前面的实验设计,归纳共性,找出差异,增加印象。
3.情感态度与价值观
形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
1.教学重点
无菌技术的操作。
2.教学难点
无菌技术的操作。
——— 基/ 础/ 点·精/ 练 ———
知识点一 培养基的种类
1.有关培养基配制原则表述正确的是( )
A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子
B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素
C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响
D.营养物质的浓度越高越好
答案 C
解析 培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源,分离自生固氮菌的培养基中,不需加入氮源,A错误;一般来说,在培养基中碳源和氮源具有一定比例,但培养基中含量最多的应该是水,而不是碳元素或氮元素,B错误;微生物的培养过程中除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响,C正确;营养物质的浓度越高可能会造成微生物渗透失水死亡,D错误。
2.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是( )
A.操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C.待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D.待平板冷却凝固约5~10 min后,将平板倒过来放置
答案 A
解析 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,A错误;将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热,B正确;待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,C正确;待平板冷却凝固约5~10 min后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,D正确。
3.氯嘧磺隆是一种常用于除大豆田地阔叶杂草的有机物除草剂,长期使用氯嘧磺隆造成土壤和水体的污染。某同学将从污染的土壤中筛选出高效降低氯嘧磺隆的分解菌。用已学知识回答下列问题:
(1)培养微生物的培养基一般都含有水、____________和碳源、氮源。
(2)在筛选高效分解菌过程中,应将土壤样品稀释液接种到以__________为唯一碳源的固体培养基上,该培养基从功能上看属于________培养基。
(3)培养微生物的培养基常采用________法进行灭菌。
(4)统计样品活菌数目时,常采用的接种方法是______________。将10 g土样进行浓度梯度逐步稀释后,在4个培养基平板上均接种稀释倍数为103的土壤样品液0.1 mL,培养一段时间后,平板长出的菌落数分别为189、210、204和434,由此得出每克土壤样品中的分解菌数量为__________个。用该方法统计的活菌数往往比真实值低的原因是_____________________________________________________。
答案 (1)无机盐
(2)氯嘧磺隆 选择
(3)高压蒸汽灭菌
(4)稀释涂布平板法 2.01×106 两个或多个细胞连在一起时,培养后的平板上观察到的只是一个菌落(或平板上观察到的一个菌落可能是由两个或多个细胞连在一起繁殖而来的)
解析 理清微生物的实验室培养与应用、微生物的分离与计数等知识脉络,然后结合题意进行相关试题的解答。(1)培养微生物的培养基一般都含有水、无机盐、碳源和氮源。(2)为了从污染的土壤中筛选出高效降低氯嘧磺隆的分解菌,应选用以氯嘧磺隆为唯一碳源的固体培养基进行选择培养。在该培养基中,只有能降解氯嘧磺隆的微生物才能生长,而其他微生物则不能生长,所以从功能上看,该培养基属于选择培养基。(3)常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。(4)统计样品活菌数目时,常采用的接种方法是稀释涂布平板法。统计的菌落数应介于30~300之间,所以应选择菌落数为189、210、204的平板计数,据此并依题意可推知:每克土壤样品中的分解菌数量为[(189+210+204)÷3÷0.1]×103=2.01×106个。使用稀释涂布平板法纯化微生物,两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(或平板上观察到的一个菌落可能是由两个或多个细胞连在一起繁殖而来的),因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
知识点二 培养基的应用
4.培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础,下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是( )
A.微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质及琼脂
B.不论何种培养基,在各成分溶化