内容正文:
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 见学生用书P015
学习目标
重点难点
1.知识目标
利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产、生活中有关微生物的计数。
2.能力目标
分析研究思路的形成过程,找出共性和差异性。
3.情感态度与价值观
形成无菌不在的概念,养成讲究卫生的习惯。
1.教学重点
对土样的选取和选择培养基的配制。
2.教学难点
对分解尿素的细菌的计数。
——— 基/ 础/ 点·精/ 练 ———
知识点一 分解尿素的细菌的鉴定
1.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )
A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
答案 A
解析 在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高,酚红指示剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素。综上所述,A项正确,B、C、D三项均错误。
2.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( )
A.筛选出能分解尿素的细菌
B.培养基中缺乏酚红指示剂作细菌的营养
C.对分离的菌种作进一步的鉴定
D.如指示剂变蓝就能准确认定该菌能分解尿素
答案 C
解析 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂将变红,这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素,故选C。
知识点二 分离分解尿素的细菌的实验流程
3.下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述,不正确的是( )
A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置
B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数
C.在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同
D.在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染
答案 C
解析 “土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中,经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置,以防止杂菌污染,A正确;同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数,并求其平均数,B正确;细菌进行二分裂增殖,不能保证遗传物质平均分配,在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同,C错误;在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染,D正确。
4.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的是( )
A.将土壤用无菌水稀释,制备103~105稀释倍数的土壤稀释液
B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
答案 C
解析 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌时,将土壤用无菌水稀释,制备土壤稀释液,将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上,用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以鉴别分解尿素的细菌。从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株。
5.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是( )
A.3号试管的稀释倍数为103倍
B.4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数一定为5号试管的10倍
C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
答案 C
解析 2号试管中的菌落稀释倍数为103倍,A错误;4号试管中稀释液进行平板培养,稀释倍数比5号试管的低10倍,如果稀释倍数适当,得到的菌落平均数可能是5号的10倍,B错误;5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷3×106×10=1.7×109个,C正确;稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落,使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低,D错误。
6.“节约一张纸,增添一片绿。”纸的主要成分是木质纤维,以纤维素类物质生产燃料乙醇的研究越来越受重视。
(1)该技术需要从土壤中获得纤维素分解菌,获得该菌的方法是在含有纤维素的培养基上,加入____________染料,筛选周围有____________的菌落。其产生的分解纤维素的酶至少包括________________________三种组分,在这三种酶协同作用下,纤维素最终被水解成____________。
(2)用获得的糖液发酵生产乙醇,常用的微生物是____________,在________________条件下的发酵液中,该菌可以继续生长繁殖,而绝大多数微生物受到抑制。