考点13 血红蛋白的提取和分离-2020-2021学年高二《新题速递·生物》5月刊（同步课堂必刷题）（人教版选修1）

考点13 血红蛋白的提取和分离 一、单选题 1．（2021·河南高二期中）下列有关凝胶色谱操作的说法，错误的是（　　） A．该方法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 B．a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是a C．如果发生洗脱液流干露出凝胶颗粒的现象时，应马上加入洗脱液 D．色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构，可由尼龙网和尼龙纱替 【答案】C 【分析】 凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。（3）分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。（4）作用：分离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等。 【详解】 A、分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法，该方法是依据相对分子质量的大小分离蛋白质，A正确； B、由图可知，a的相对分子质量大于b，a、b均为蛋白质分子，故其中先从层析柱中洗脱出来的是相对分子质量较大的蛋白质a，B正确； C、在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干、露出凝胶颗粒的情况，一旦发生这种情况，需重新装填凝胶色谱柱，C错误； D、色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构，能由尼龙网和尼龙纱替代，D正确。 故选C。 2．（2021·河南高二期中）下列关于电泳鉴定原理的说法，正确的是（　　） A．在一定的pH条件下DNA分子会带上正电荷或负电荷 B．带电分子在电场的作用下会向着与它所带电荷相同的电极移动 C．通常用琼脂糖凝胶电泳来测定蛋白质的分子量 D．SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳时迁移率取决于分子带电性质和大小 【答案】A 【分析】 凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。 【详解】 AB、DNA分子带有带电的基团，因此在一定的pH条件下DNA分子会带上正电荷或负电荷，由于同性相斥、异性相吸，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，A正确、B错误； C、测定蛋白质的分子量可通过SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳，C错误； D、使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，其迁移率只取决于样品中各种分子量的大小，D错误。 故选A。 3．（2021·四川省绵阳南山中学高二期中）下列对血红蛋白提取和分离的叙述，正确的是（ ） A．采集血样后分离红细胞时采用的是低速长时间离心 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 D．实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血红蛋白变性 【答案】B 【分析】 1、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有： （1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液。 （2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。 （3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。 （4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2、凝胶色谱法的原理：根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。 【详解】 A、采集血样后分离红细胞时采用的是低速短时间离心，A错误； B、猪属于哺乳动物，猪成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少，是提取和分离血红蛋白的良好材料，B正确； C、纯化过程中要用缓冲液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液，C错误； D、实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固，D错误。 故选B。 4．（2021·四川省绵阳南山中学高二期中）下列有关凝胶色谱操作的叙述，错误的是（ ） A．分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动快 B．在装填凝胶色谱柱时，产生的气泡不影响洗脱次序 C．透析后的样品加到色谱柱时，注意不要破坏凝胶面 D．在样品洗脱过程中，不能让洗脱液流干 【答案】B 【分析】 凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 【详解】 A、分离过程中，血红蛋白比分子量小的蛋白质经过的路程短，移动速度快，A正