内容正文:
考点06 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、多选题
1.(2021·山东泰安市·高三一模)如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是( )
A.用移液管吸取菌液进行梯度稀释时,可用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀
B.对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数必然为5号试管的10倍
C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109
D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低
【答案】ACD
【分析】
从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是:土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。图中5支试管为梯度稀释,最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。
【详解】
A、用移液管稀释菌液时,吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀,防止对后续的稀释过程造成影响,A正确;
B、4号中稀释液进行平板培养,稀释倍数比5号的低10倍,如果稀释倍数适当,得到的菌落平均数可能是5号的10倍,B错误;
C、分析图解可知,菌液一共稀释106倍,每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷3÷0.1×106≈1.7×109个,C正确;
D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落,使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低,D正确。
故选ACD。
2.(2021·沂源县第二中学高二期中)下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述,不正确的是( )
A.实验中采集的土样经高温灭菌后,可以用于制取土壤稀释液
B.分离土壤中能分解尿素的细菌时,应选择以尿素为唯一氮源的培养基
C.测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜直接计数法
D.接种土壤微生物稀释液时,平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布
【答案】ACD
【分析】
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:(1)分离原理:土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶能将尿素分解成二氧化碳和氨。(2)统计菌落数目:统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。(3)实验流程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。
【详解】
A、在分离土壤中的尿素分解菌实验中,采集的土样经高温灭菌后,土样中的微生物被杀死,再制取土壤稀释液接种并培养,不会得到菌落,A错误;
B、尿素分解菌能分解尿素,筛选分解尿素的细菌时,应以尿素为唯一氮源的选择培养基培养,B正确;
C、测定土壤样品中的活菌数目,常用活菌计数法,即稀释涂布平板法,C错误;
D、接种土壤微生物稀释液时,稀释涂布平板法是通过涂布器的操作使微生物均匀分布,D错误。
故选ACD。
3.(2021·凤城市第一中学高二月考)如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析,下列叙述正确的是( )
A.2号试管的稀释倍数为103倍
B.4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰好为5号试管的10倍
C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
【答案】AC
【分析】
从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是:土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。图中5支试管为梯度稀释,最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30~300的平板,取其平均值,进行计数。计数公式为(C÷V)×M。(C为平均菌落数,V为涂布液体积,M为稀释倍数)
【详解】
A、据图可知,号试管的稀释倍数为103倍,A正确;
B、4号试管中稀释液进行平板培养,由于4号稀释倍数比5号的低10倍,如果稀释倍数适当,得到的菌落平均数可能是5号的10倍,B错误;
C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109个,C正确;
D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落,使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低,D错误。
故选AC。
4.(2021·辽宁高三一模)尿素分解菌产生的脲酶能够把尿素分解为氨使pH升高,为自身生命活动提供能量,下列说法错误的是( )
A.培养尿素分解菌的关键是防止杂菌污染
B.培养基中加入尿素为唯一氮源的原因是只有尿素分解菌能分解尿素为生命活动供能
C.尿素分解菌的代谢类型是自养需氧型,所以实验中需要振荡培养,为其提供更多的氧气
D.稀释涂布平板法和平板划线法都能分离尿素分解菌获得单菌落
【答案】BC
【分析】
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中,需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基,计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适,计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。
【详解】
A、微生物培养