内容正文:
第37讲 微生物的利用
[目标要求] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。
考点一 微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类
①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
2.无菌技术
(1)目的:获得纯净培养物。
(2)关键:防止外来杂菌的入侵。
(3)常用方法:灭菌和消毒。
(4)无菌技术的主要方法及适用对象(连一连)
教材中的隐性知识 源于选修1P85附录4“高压灭菌的操作方法”
(1)灭菌桶装入待灭菌物品不要装太挤的原因是避免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
(2)加热灭菌锅时应打开排气阀,目的是排除锅内冷空气,之后,才能关上排气阀。
3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
(1)计算
↓
(2)称量
↓
(3)溶化
↓
(4)灭菌
↓
(5)倒平板
4.纯化培养
(1)方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
(2)菌落的概念:由单个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
(3)平板划线法分离纯化大肠杆菌
①
接种
在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌,在摇床上37℃下振荡培养12h
②
划线
分离
用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中沾取菌液一次,在固体培养基的平板上连续划线,盖好培养皿
③
培养
观察
将培养皿倒置,放在37℃恒温箱中培养12~24h后,可看到划线的末端出现不连续的单个菌落
(4)稀释涂布平板法步骤
①系列稀释操作:该操作常用在将细胞接种到培养基之前,通过液体稀释的方法分散细胞,随着稀释程度的增大,单位体积中的微生物细胞数量减少,细胞得以分散。
操作步骤:
②涂布平板操作步骤
教材中的隐性知识 源于选修1P18“旁栏小资料”
(1)微生物的接种方法除平板划线法和稀释涂布平板法外,还包括斜面接种、穿刺接种等方法。
(2)微生物接种的核心是防止杂菌污染,保证培养物的纯度。
5.菌种的保藏方法
主要方法
临时保藏法
甘油管藏法
保藏对象
频繁使用的菌种
长期保藏的菌种
方法步骤
先接种到试管的固体斜面培养基上培养,然后放入4℃的冰箱中
转入灭菌后的甘油中