内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
一 微生物的基本培养技术
【学习目标】
1.说明培养基的作用、类型及成分,掌握培养基的配制方法
2.熟悉常用的无菌技术,根据需要选择正确的消毒和灭菌方法——社会责任
3.以酵母菌的纯培养为例,掌握微生物的纯培养技术——科学探究
知识点一 培养基的配制
[新知梳理]
培养基
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)种类:按物理性质分
(3)成分:
①主要营养物质:水、碳源、氮源、无机盐。
②其他条件:pH、特殊营养物质和氧气。
[互动探究]
1.在培养乳酸杆菌、霉菌、细菌和厌氧微生物时,除了主要营养物质,一般还需要分别满足所培养微生物的哪些特殊需求?
提示:在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素;在培养霉菌时,需要将培养基调至酸性;在培养细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生物时,需要提供无氧环境。
2.在牛肉膏蛋白胨培养基中,牛肉膏和蛋白胨分别为微生物主要提供哪些营养成分?
提示:牛肉膏主要提供碳源、磷酸盐和维生素等;蛋白胨主要提供氮源和维生素等。
3.培养微生物时,培养基中是否必须有碳源和氮源?
提示:不一定,例如培养自养微生物时,一般不需要添加碳源,微生物可以利用空气中的二氧化碳;培养固氮微生物时,一般不需要添加氮源,微生物可以利用空气中氮气。
[归纳总结]
1.培养基的成分
营养物质
定义
作用
主要来源
碳源
凡能提供碳元素的物质
构成生物体细胞的物质和一些代谢产物,有些也是异养生物的能源物质
无机碳源:CO2、NaHCO3等;有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等
氮源
凡能提供氮元素的物质
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
无机氮源:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨等
生长因子
生长必不可少的微量有机物
是酶和核酸的组成成分
维生素、氨基酸、碱基等
水
[来源:Zxxk.Com]
不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定
培养基、空气、代谢产物
无机盐
为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素和微量元素
是细胞的组成成分、生理调节物质、某些化能自养菌的能源、酶的激活剂等
无机化合物
2.培养基配制的原则
(1)目的要明确:不同的微生物需求不同,根据培养目的进行配制。
(2)营养要协调:营养物质的浓度和比例要适宜。营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要,过高对微生物的生长有抑制作用。
(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌的适宜pH约为6.5~7.5、放线菌的适宜pH约为7.5~8.5、真菌的适宜pH约为5.0~6.0。为维持pH的相对恒定,可在培养基中加入缓冲剂,常用的缓冲剂是磷酸氢二钾—磷酸二氢钾。
[特别提醒] 几种微生物的营养和能量来源
微生物
碳源
氮源
能源
蓝藻
CO2
NH、NO等
光能
硝化细菌
CO2
NH3
NH3的氧化
根瘤菌
糖类等有机物
N2
有机物
大肠杆菌
糖类、蛋白质等有机物
蛋白质等
有机物
[题组通关]
1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含( )
A.碳源、磷酸盐和维生素
B.氮源和维生素
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素
解析 培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。
答案 C
2.下列关于微生物的营养,说法正确的是( )
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量
解析 对一些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量。CO2和N2都是无机物,也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是氨,氨为无机氮源,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。
答案 D
[方法技巧]
根据微生物的代谢类型选择碳源、氮源的技巧
1.自养型微生物:需要无机碳源,如CO2、NaHCO3等;需要无机氮源,如N2、NH3、铵盐、硝酸盐等。
2.异养微生物:需要有机碳源,如糖类、脂肪酸、花生粉饼、牛肉膏、石油等;需要有机氮源,如尿素、牛肉膏、蛋白胨等。
知识点二 无菌技术
[新知梳理]
1.目的:获得纯净培养物。
2.关键:防止外来杂菌的污染。
3.消毒与灭菌的比较
项目
消毒
灭菌
作用强度
较为温和的理化因素
强烈的理化因素
作用程度
杀死物体表面或内部的一部分微生物
杀死物体内外的所有微生物
芽孢和孢子
一般不能杀灭
能杀灭
适用对象
实验操作的空间、操作者衣着和双手
微生物培养器皿、