内容正文:
2021
第2节 基因工程的基本操作程序
动物细胞
植物细胞
原核细胞(大肠杆菌、土壤农杆菌等)
将目的基因导入受体细胞
第三步
常用的受体细胞
针对不同的受体细胞,选用不同的方法。
课堂篇探究学习
导入植物细胞
②农杆菌转化法
我国科学家独创
①花粉管通道法
在植物授粉后一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴在花柱切面,使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。
花粉
卵细胞
精子
花粉管
如
用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中;
多种操作方法
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农杆菌转化法
易感染双子叶植物和裸子植物;
内含Ti质粒,其上的T-DNA可转移至受体细胞的染色体DNA上。
农杆菌特点
Ti质粒
T-DNA
目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
转化
课堂篇探究学习
Ti质粒
目的基因
构建
表达载体
导入
植物细胞
插入
植物细胞染色DNA
表达
新性状
转入
农杆菌
课堂篇探究学习
将从叶片取下的圆形小片与农杆菌共培养,筛选转化细胞,再生成植株;
随转化方法的突破,用农杆菌侵染水稻 、玉米等单子叶植物也取得成功。
如
根据受体植物不同,具体转化方法有所区别
将花序浸没在含农杆菌的溶液中,培养植株并获得种子,再进行筛选、鉴定。
课堂篇探究学习
导入动物细胞
显微注射技术
受精卵
方法
注入
课堂篇探究学习
转化方法
将含有目的基因的表达载体提纯
取卵(受精卵)
显微注射
受精卵发育
获得具有新性状的生物
课堂篇探究学习
基因工程中,常用原核生物作为受体细胞。
1.繁殖周期短
2.体积小易于培养操作
3.多为单细胞,遗传物质相对较少
4.经济实用
导入微生物细胞
优点
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感受态细胞法
大肠杆菌
感受态细胞吸收DNA分子
Ca2+处理细胞
感受态细胞
重组表达载体与感受态细胞混合
常用菌
转化方法
课堂篇探究学习
受体生物 植物 动物 微生物
受体细胞
导入方法
受精卵
体细胞
受精卵
细胞/个体
农杆菌转化法
基因枪法
花粉管通道法
显微注
射技术
用Ca2+处理成感受态细胞
总结
例:科学家通过基因工程的方法,将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内,并成功实现了表达,从而培育