内容正文:
第3章
基 因 工 程
思考:
如何将DNA提取出来,并进行鉴定呢?
DNA
DNA
课堂篇探究学习
DNA的粗提取与鉴定
探究和实践
提取生物大分子的基本思路
基本思路
提取DNA的方法
选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
(一)基础知识
课堂篇探究学习
目的基因;转基因生物
1、DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可初步分离DNA与蛋白质。
(二)DNA粗提取的原理
2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
---DNA的溶解性和耐受性
3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶—水解蛋白质,对DNA没有影响。
②高温—大多数 在60~80℃时变性沉淀,而 在
80℃以上才会变性。
③洗涤剂—溶解细胞膜,
去除 ;
但对DNA没有影响。
蛋白质
DNA
脂质、蛋白质
4、DNA的鉴定
在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色,因此用二苯胺试剂鉴定DNA分子。
DNA
+
二苯胺
沸水浴
蓝色
(三)目的要求
1、了解DNA的物理化学性质;理解DNA粗提取
和鉴定的原理
2、学会DNA粗提取的方法以及利用二苯胺试剂
对DNA 进行鉴定
(四)材料用具
不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。你认为如下提供的材料中哪些不适合提取DNA?为什么?
供选材料:(括号内为染色体条数)
新鲜洋葱(16)、香蕉、菠菜(12)、菜花、、猕猴桃(58);
猪肝(38)、鱼卵、鸡血(78)、哺乳动物的成熟红细胞;
在液体培养基中培养的大肠杆菌(1)
原则上,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑
选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。
1、实验材料的选取
2、实验用具
烧杯、量筒、玻璃棒、
研钵、纱布、漏斗、
试管、试管架、试管夹、
酒精灯、石棉网、三脚架、火柴、
刀片和天平等。
(五)方法步骤:
1.研磨洋葱
2.过滤获取含DNA的上清液
3.冷却酒精析出DNA
4.DNA的鉴定
称取约30g洋葱切碎,放入研钵中,倒