内容正文:
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
三、实验操作(以大肠杆菌的纯化培养为例)
2、纯化大肠杆菌
最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法
微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法。虽然这些技术和操作方法各不相同,但是,其核心都是要防止杂菌污染,保证培养物纯度。
2、纯化大肠杆菌
平板划线
连续划线
稀释分散
灼烧
冷却
末端
一
划破
2、纯化大肠杆菌
稀释涂布平板
梯度稀释
稀释度
涂布
灭菌
酒精灯火焰旁
70%酒精
冷却
分布均匀
2、纯化大肠杆菌
2、纯化大肠杆菌
2、纯化大肠杆菌
各梯度分别涂布3个平板
1个不涂布作空白对照
稀释103倍
稀释104倍
稀释105倍
思考1、接种操作完成之后,也需将平板倒置放入培养箱中培养,此时倒置的目的是?
分析:___________________________________________________
___________________。
思考2、某同学涂布的平板经培养后得到如图
所示菌落,造成这种结果的原因是_________________________。
思考3、某同学涂布的平板经培养后,菌落与菌落连成了一片,
造成这种结果的原因是_________________________________。
思考4、平板划线法既是_________微生物的方法,也是微生物
_________的方法。除了这两种接种方法外,还有
__________________、__________________等方法。
防止水分过快挥发,防止培养基表面形成水珠,从而造成菌落的混杂
涂布所用稀释液的稀释度不够高
纯化
接种
斜面接种
穿刺接种
涂布平板时未涂布均匀
1、培养基的制作是否合格
培养未接种培养基的作用是对照,如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。
2、接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点(呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整齐),则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。
课题成果评价
培养12h与24h后的