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专题4 酶的研究与应用
第12课时 果胶酶在果汁生产中的作用
目标导航 1.简述果胶酶的作用。2.检测果胶酶的活性。3.探究温度、pH和酶的抑制剂对果胶酶活性的影响及果胶酶的最适用量。
一、基础知识
1.果胶酶的作用
(1)果胶的成分及作用:果胶是植物________以及________的主要组成成分之一,它是由________________聚合而成的一种高分子化合物,不溶于水。
(2)果胶酶的作用:果胶酶能够把果胶分解成可溶性的________________。
(3)果胶酶的组成:果胶酶并不特指某一种酶,而是____________的一类酶的总称,包括________________、________________和____________等。
提醒 由于原核生物的细胞壁的主要成分是肽聚糖,真菌细胞壁的主要成分是几丁质,因此这两类生物的细胞壁均不能用纤维素酶和果胶酶除去。
(4)果胶酶的来源:______、________、________和________均能产生果胶酶。由________发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂之一,被广泛地应用于果汁加工业。
2.酶的活性与影响酶活性的因素
(1)酶的活性:是指酶________________的能力。酶活性的高低可以用在一定条件下,酶所催化的某一化学反应的____________来表示。
(2)酶的反应速度:用____________内、____________中反应物的________或产物的________来表示。
影响酶活性的因素主要有________、________和____________等。
3.酶的用量
酶用量过多,会导致酶的________;酶用量过少,会________酶促反应的速度。因此要得到适宜的酶用量,需通过设计实验进行探究。
二、实验设计
1.探究温度对酶活性的影响
(1)实验原理
①果胶酶活性受温度影响。在一定范围内,随着温度的升高,酶的活性逐渐________;超过一定温度之后,随着温度的升高,酶的活性逐渐降低;当达到一定温度后,酶的活性____________。酶的活性随温度的升高而变化的趋势可用下图表示:
②通过测定____________内滤出的________________大小来判断果胶酶的活性的原理是:果胶酶将果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸,半乳糖醛酸可通过滤纸,因此________________和________________反映了果胶酶催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH条件下,果胶酶的活性越高,苹果汁的体积就________,同时果汁也越________。
(2)实验操作流程
各取一支分9组,分别放入30℃、35℃、40℃、45℃、
50℃、55℃、60℃、65℃和70℃的恒温水箱中恒温加热
↓
↓
恒温保持10 min
↓
比较果汁的澄清度,或过滤果汁,用量筒测量果汁的
量,并记录结果
(3)记录结果
实验温度
30℃
35℃
40℃
45℃
50℃
55℃
60℃
65℃
70℃
果汁量
(mL)
(4)实验分析
①本实验的实验对象是____________,温度为________,属于探究性的定量实验。这类实验的自变量通常是通过设置梯度来确定最适值。第一轮实验设置的梯度差通常较大,缩小范围后,在第二轮实验中可设置较小的梯度差。酶遇高温变性后,很难再恢复活性,不宜再回收利用。
②在混合苹果泥和果胶酶之前,要将苹果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理,其目的是____________________________相同,避免苹果泥与果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响果胶酶的活性。
提醒 (1)探究不同温度(或pH)对果胶酶活性的影响,温度(或pH)为自变量,且应严格控制其他无关变量均相同,通过设置合理的温度(或pH)梯度来确定最适值。
(2)在苹果泥和果胶酶混合之前,一定要保证底物和酶先达到相同的条件(温度或pH),避免混合后条件发生变化,以确保实验结果的准确性。
2.探究pH对酶活性的影响
(1)实验原理
大部分酶的活性受pH的影响,在一定pH下,酶促反应具有最大速度,高于或低于此pH,反应速度都下降,通常称此pH为酶反应的________。
pH对酶活性的影响可用下图表示:
(2)实验流程及注意问题
①用搅拌器搅拌制取苹果泥,苹果泥来源要________(最好是同一个苹果)。
注意 制取苹果泥时,可先将苹果切成小块放入搅拌器中,加入适量的水后再进行搅拌;如果用橙子做实验,不必去皮。
②将分别装有________和________的试管在恒温水浴中保温。
注意 a.苹果泥的用量和果胶酶的用量比例