内容正文:
课题3 分解纤维素的微生物的分离
1.纤维素与纤维素酶
2.纤维素分解菌筛选
纤维素由C.H.O元素组成,是一种多糖,基本单位是葡萄糖。人体内没有分解纤维素的酶,所以人体不能直接利用纤维素,土壤中有分解纤维素的微生物,最终分解成CO2与水释放到环境中去
分布:棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。
纤维素酶:一种复合酶,至少包括C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶。
纤维素---纤维二糖
纤维二塘---葡萄糖
筛选方法:
筛选原理:
刚果红染色法
刚果红是一种染料,与纤维素形成红色混合物,不与纤维二糖和葡萄糖发生反应。当纤维素被纤维素酶分解后,培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈
实验设计
分离土壤中分解纤维菌的实验操作
1.土壤的取样
2.选择培养
3.稀释涂布
4.挑选菌落
采集富含纤维素的土壤中
目的:
方法:
增加纤维素分解菌的浓度,以确保从样品中分离所需要的微生物
利用富含纤维素的选择培养基
将土样加入装有选择培养基的锥形瓶中,之后固定在摇床上,一定温度振荡1-2d,直至培养液变混浊。
吸取适量的培养液,稀释涂布到鉴别培养基上,倒置培养
挑选产生透明圈的菌落,直径越大,微生物产生纤维素酶能力越强。
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透明圈
项目
内容 尿素分解菌 纤维素分解菌
条件 ______为唯一氮源 ________为唯一碳源
鉴定方法
及现象 培养基中加入_______指示剂,变红色 应用_________红染色法;出现以纤维素分解菌为中心的___________
鉴定原理 细菌等微生物生成_____酶,使尿素中肽键断裂产生NH3,使pH升高,加入酚红变红色 微生物产生纤维素酶,将纤维素分解为________________,使纤维素—刚果红复合物降解而出现透明圈
尿素
纤维素
酚红
刚果
纤维二糖或葡萄糖
透明圈
脲
比较出两种土壤微生物的分离与鉴定
分解纤维素的微生物的分离
基础知识
实验设计
纤维素酶:一种复合酶,至少包括C1酶,Cx酶,葡萄糖苷酶
纤维素分解菌的筛选:利用刚果红染料
土壤取样:选择纤维素丰富的环境
选择培养:增加纤维素分解菌的浓度
纤维素:一种由葡萄糖首尾相连的高分子化合物
梯度稀释:稀释至101-106
将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
挑选产生透明圈的菌落
本节小结
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