内容正文:
[热点概述]——掌握热点知识
1.酶的验证、探究或评价性实验题解题模板
2.有关酶促反应实验的注意事项
反应物和酶的选择
①研究酶的适宜温度实验时,不宜选用过氧化氢酶催化过氧化氢的分解,因为过氧化氢在加热的条件下分解会加快;
②研究酶的适宜pH实验时,由于酸对淀粉有分解作用,并且碘液可与碱反应,所以一般不选用淀粉和淀粉酶作为实验材料,常选用过氧化氢和过氧化氢酶
检测时试剂的
选择
①研究温度对酶活性影响的实验时,检测淀粉是否分解时用碘液,一般不选用斐林试剂,因为用斐林试剂检测需水浴加热,而该实验中需严格控制温度;
②若物质反应前后均能与试剂发生反应,如麦芽糖和水解后形成的葡萄糖均能与斐林试剂反应,再如蛋白质和水解后形成的多肽均能与双缩脲试剂反应,此类试剂不能选用;
③若物质反应前后均不能与试剂反应,如蔗糖和水解后的单糖均不能与碘液反应,此类试剂也不能选用
[热点专练]——突破关键能力
1.请回答下列有关酶的实验探究问题:
(1)为证明过氧化氢酶的活性受pH的影响,同学甲做了如下实验:
试篇编号
A
B
实验
步骤
1
加入2 mL 5%H2O2溶液
加入2 mL 5%H2O2溶液
2
5滴2%过氧化氢酶溶液
5滴2%过氧化氢酶溶液
3
0.5 mL 5%NaOH溶液
0.5 mL 5% HCl溶液
4
观察气泡的产生速率
观察气泡的产生速率
上述实验设计中有两处不妥,请指出:
①____________________________________________________;
②____________________________________________________
_____________________________________________________。
(2)一般情况下,不能用过氧化氢酶为材料探究温度对酶活性的影响,若要设置实验来证明温度能影响过氧化氢酶的活性,你认为应该怎样设置?___________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
(写出设计思路即可)。查阅资料发现:H2O2在受热和日光照射时分解速率加快,在温度为30 ℃以下时比较稳定,在70 ℃以上时,分解速率加快。你认为设计上述实验时,应特别注意的事项是__________________________________________________________。
解析:(1)①验证酶的活性受pH影响时。除了设置酸性条件、碱性条件的实验组外,还需要设置pH=7的对照组。②探究pH、温度对酶活性的影响时,应先将酶和底物置于相应的条件(pH、温度)下处理一段时间,然后再将酶与底物混合。(2)若要设置实验来证明温度能影响过氧化氢酶的活性,可采取每一温度下设置两支试管,一支试管中加入过氧化氢酶,另一支不加,比较同一温度下这两支试管中气泡的产生速率。但是要注意温度不宜太高,因为在较高温度下保温时。H2O2分解速率较快,可能会出现未加酶而H2O2已全部分解的情况。
答案:(1)①缺少pH=7的对照组 ②加入NaOH溶液和HCl溶液的时间顺序不合理,应在加入过氧化氢酶前将其加入,用于改变溶液的pH
(2)将盛有过氧化氢酶的试管保温于一系列不同温度下一段时间,然后与同温度的H2O2溶液混合,观察同温度下加过氧化氢酶和不加过氧化氢酶的两组试管中气泡的产生速率 将温度控制在70℃以下
2.(2020·福建宁德质检)某兴趣小组为了探究pH对某种酶活性的影响,做了如下实验。
实验步骤:
步骤一:取3支洁净的试管,编号为A、B、C,分别加入等量的酶溶液;
步骤二:在每支试管中加入等量的底物溶液;
步骤三:在A、B、C试管中加入等量的缓冲液,使pH分别稳定在5.0、7.0、9.0;
步骤四:将3支试管置于不同的温度条件下,定时检测产物浓度。
请回答下列问题:
(1)上述实验步骤中存在两处明显错误,请更正:_____________
_______________________________________________________
______________________________________________________。
(2)在实验操作正确的情况下,实验结果如下图所示。
①实验中酶促反应速率可用_____________________________
表示。实验开始1 min后A组产物浓度不再增加的原因是_______________