专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（备课堂）-【上好课】2020-2021学年高二生物同步备课系列（人教版选修1）

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 【学习目标】 1、明确用培养基对微生物进行选择的原理。(重点) 2、学会统计微生物数量的方法。(重点) 3、能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析和评价。(难点) 【课题背景】 尿素的利用 尿素 CO(NH2)2 尿素不能直接被农作物吸收。 土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 CO(NH2)2 + H2O 脲酶 2NH3 + CO2 细菌 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。 （一）筛选菌株 1、实例： PCR（DNA多聚酶链式反应） 科学家从热泉中发现的水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶 一、研究思路 2、实验室中微生物的筛选原理： 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 之后讲课本P22的最上面内容 3、本实验所需的培养基 特点：以尿素为唯一氮源 缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，因缺乏氮源而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g 葡萄糖 0.2g MgSO4`7H2O 2.1g NaH2PO4 1.4g KH2PO4 4、选择培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，叫做选择培养基。 实例： ①以尿素作为唯一氮源的培养基可以分离出分解尿素的细菌。 ②加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ③加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 ④无氮源培养基可以分离固氮微生物。 ⑤石油是唯一碳源的培养基，可以分离能消除石油污染的微生物。 ⑥培养基放在高温环境中培养，分离耐高温的微生物。 1、显微镜直接计数： 每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10 000×稀释倍数。 （二）统计菌落数目 *不能区分死菌与活菌； 缺点： 2.间接计数法（活菌计数法） ⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。 ⑵常用方法：稀释涂布平板法。 每克样品中的菌落数＝(平均菌落数÷涂布的稀释液的体积)×稀释倍数 (3)注意