内容正文:
微生物的实验室培养
【学习目标】
1、知道培养基的种类、营养要素及配制原则。(重点)
2、掌握消毒、灭菌的原理和方法。(重点)
3、学会配制培养基和纯化大肠杆菌的方法。(重、难点)
一、基础知识
(一)培养基
1、概念:
2、种类
据物理性质,培养基的种类包括固体培养基和 液体培养基 。
琼脂:
琼脂是一种从红藻中提取的多糖,在配制培养基中用作为凝固剂 。98℃以上融化,44℃一下凝固。
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
【补充】培养基的类型及其应用:
3、培养基的成分
(1)主要营养物质:一般都含有有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
(2)还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(生长因子),如维生素、氨基酸和碱基等,以及氧气的要求。
生长因子:某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子,如某些氨基酸、碱基、维生素等。
微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物
特殊营养物质 添加维生素 pH调至酸性 pH调至中性或微碱性 无氧
(二)无菌技术
获得纯净培养物的关键是 。
1、 无菌技术包括:
1)对实验操作空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒;
2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 ;
3)为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰旁进行
4)避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。
防止外来杂菌的入侵
无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2、消毒和灭菌
芽孢≠孢子
消毒 灭菌
概念 用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子) 用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、操作者、一些液体 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
注意:区别芽孢和孢子
1)某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢。每个细菌细胞仅形成一个芽孢,故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人,可保持几年到