内容正文:
微生物
培养
培养基
无菌技术
菌种保藏
实例
纯化大肠杆菌
土壤中分解尿素细菌的分离与计数
分解纤维素的微生物的分离
平板划线法
稀释涂布平板法活菌计数
显微镜直接计数法 活死都计
刚果红染色法
人们按照微生物对营养物质的不同需求,
配制出供其生长繁殖的营养基质
种类
制备步骤
消毒
灭菌
临时
长期 甘油管藏(-20°C)
斜面培养基(4°C)
水
无机盐
碳源
氮源
自养型
异养型
无机碳源或空气中CO 2
有机碳源
固氮微生物 空气中N2
按状态分
按功能分
选择培养基
鉴别培养基
固体培养基
液体培养基
半固体培养基
菌落
发酵、扩大培养
计算→称量→溶化→调 pH→灭菌→倒平板 倒置
防止皿盖上的水珠落入培养基
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物理表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂(酒精)消毒法、紫外线消毒法
概念 使用强烈的理化因素杀死物体内所有微生物(包括芽孢和孢子)
常用方法 灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
专题15 微生物的培养、分离与计数
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概念 身体微小、结构简单、难以用肉眼观察的生物的统称
类群
非细胞生物
细胞生物
病毒
原核生物
真核生物
真菌
单细胞藻类
原生生物
概念
液体环境、组成细胞结构、良好溶剂、参与反应
提供无机营养、作为缓冲剂保持 pH稳定、调节渗透压
葡萄糖提供能量和合成其他物质的原料
由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(种群) 计数
物种特异性 形状、大小、隆起程度和颜色等 分离、鉴别
定义 允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
实例
纤维素为唯一碳源 筛选分解纤维素的微生物
尿素为唯一氮源 筛选分解尿素的微生物
添加抗生素 筛选真菌
提供合成有机物所需氮元素
定义 利用微生物的代谢产物与指示剂的显色反应鉴别不同微生物的培养基
实例
大肠杆菌 伊红-美蓝培养基
分解尿素的细菌
分解纤维素的微生物
酚红
刚果红
分离纯化
对照 牛肉膏蛋白胨培养基
纤维素酶
纤维
素
纤维二
糖
葡萄糖
C1酶和Cx酶 葡萄糖苷酶
麦芽汁琼脂培养基 筛选酵母菌
结果偏小
菌落重叠
未接种培养基对照
避免培养基中的水分过快地挥发
传统发酵
技术的应用
菌种的
比较
制作
原理(反应式)
过程
果酒制作
果醋制作
腐乳制作
泡菜制作
果酒和果醋制作
腐乳制作
泡菜
流程图
亚硝酸盐测定
C6H12O6 2C 2H5OH + 2CO 2
氧气和糖充足
氧气和糖不足
2C6H12O6 + 2O2 2CH 3COOH + 2CO 2 +2H2O
C2H5OH + O 2 CH 3COOH + H 2O
蛋白质 小分子肽+氨基酸
脂肪 甘油+脂肪酸
C6H12O6 2C 3H6O3
原理
方法
步骤
在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐对氨基苯磺酸溶液和
N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液时会呈玫瑰红色
目测比色法
配置溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→
比色→记录对应的亚硝酸盐含量
果酒制作 果醋制作 腐乳制作 泡菜制作
(主要)菌种 酵母菌 醋酸菌 毛霉 乳酸菌
生物分类 真核生物 原核生物 真核生物 原核生物
代谢类型
异养兼性厌
氧型
异养需氧 异养需氧 异养厌氧
培养条件
18-25°C,
先通气后密
封
30-35°C,
通气
15-18°C 密封无氧
繁殖方式 出芽生殖 二分裂 孢子生殖 二分裂
酶
酶
酶
蛋白酶
脂肪酶
专题16 生物技术的应用
考点1 传统发酵技术的应用
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见后
见后
a为充气口:
制酒密封,制醋充气
b为排气口:
弯曲防止空气中的微生物
污染;制酒时排出 CO2
c为出料口:
取样
酶
在适宜的pH和温度条件下,一定
的微生物作用会将亚硝酸盐转变成
致癌物质亚硝胺。
选择材料
修整、洗涤、晾晒、
切分成条状或片状
泡菜盐水配置盐水称取食盐
加入调味
料、装坛
发酵 成品
测定亚硝酸盐含量
煮沸冷却:有效杀灭杂菌,去除水中的溶解氧。
乳酸菌比杂菌耐
酸,数量增多,
杂菌减少
挑选葡萄 冲洗 榨汁 酒精发酵 醋酸发酵 结果检测
嗅味和品尝
测pH
抑制杂菌
缺氧
酸性
条件控制
氧气
温度
时间
结果检测
酒深红色 检测方法
酒精度数提高,
葡萄皮的色素进入
嗅味和品尝
专题16 生物技术的应用
考点2 果酒和果醋的制作流程
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先冲洗后去梗 次数不要太多
防止杂菌污染 防止洗去菌种 榨汁机要清洗晾干
发酵瓶要冼净并消毒
要空出1/3空间
有氧呼吸大量繁殖 防止CO2使发酵液溢出
检测酒精
酸性重铬酸钾
灰绿色
显微镜观察
显微镜观察
观察菌膜
让豆腐上长出毛霉 加盐腌制 加卤汤装瓶
酒