大题突破14 细胞工程-2021高考生物总复习【创新教程】微点特训（新高考）

(４)根据题图分析,CAR－T 细胞对癌细胞的特异性杀 伤是通过与癌细胞特异性结合再使癌细胞裂解,故起主 要作用的是 CAR 蛋白的胞外结合区,CAR－T 细胞疗 法具有持久性是因为 CAR－T细胞与细胞免疫相似,能 够在体内形成记忆细胞. 答案:(１)限制性内切酶　DNA连接酶　(２)复制原点　 (３)显微注射法　侵染　染色体 DNA　(４)胞外结合　 形成记忆细胞 ３．解析:分析图,图中过程①表示利用 PCR 技术扩增目的 基因,过程②表示基因表达载体的构建,过程③表示将 重组质粒导入根瘤农杆菌,过程④表示目的基因的检测 和鉴定. (１)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引 物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序 列.由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的 基因和质粒,因此科研人员还在两种引物的一端分别加 上了 GAATTC和 GGATCC序列,以便于后续的剪切和 连接. (２)基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动 子、终止子和复制原点,因此过程②所构建的基因表达 载体中未标注出的必需元件还有复制原点;微生物细胞 作为受体细 胞 时,需 要 钙 离 子 处 理 使 其 变 为 感 受 态 细 胞,即过程③中需先用 Ca２＋ 处理根瘤农杆菌以便将基因 表达载体导入细胞. (３)在利用反转录法合成目的基因时,科研人员提取愈 伤组织细胞的 RNA 后,先通过逆转录过程获得 DNA, 再进行PCR扩增.干扰素基因未能导入人参愈伤组织 细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录, 这会导致通过该方法不能检测出干扰素基因. (４)科研人员认为,药物既有干扰素的治疗作用,又有人 参的滋补作用,因此将转干扰素基因的人参愈伤组织加 工成的药物比单纯干扰素的疗效要好. 答案:(１)干扰素基因两端的部分核苷酸序列　GAATTC　 GGATCC　(２)复制原点　Ca２＋ 　(３)逆转录　干扰素基因 未能导入人参愈伤组织细胞(或导入人参愈伤组织细胞的 干扰素基因未能转录) (４)将干扰素的治疗作用与人参的滋补作用相结合,能 在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等方面发挥协同作用 ４．解析:(１)合成总cDNA需提取细胞中所有的 mRNA,然 后通过逆转录过程获得.采用 PCR技术扩增 HSA 时, 母链的方向是３＇到５＇,子链的延伸方向是５＇到３＇,两条引 物分别与模板链的５＇端互补配对结合,引导子链延伸,故 两条引物延伸方向是相反的. (２)根据启动子通常具有物种及组织特异性,在水稻胚 乳细 胞 内 特 异 表 达rHSA,需 选 择 水 稻 胚 乳 细 胞 的 启 动子. (３)农杆菌具有趋化性,即植物的受伤组织会产生一些 糖类和酚类物质吸引农杆菌向受伤组织集中转化.研 究证明,主要酚类诱导物为乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香 酮,这些物质主要在双子叶植物细胞壁中合成,通常不 存在于单子叶植物中.水稻是单子叶植物,不能产生上 述的酚类化合物,故在农杆菌转化水稻受体细胞的过程 中,需要添加酚类化合物,吸引农杆菌移向水稻受体细 胞,有利于目的基因的转移. (４)水稻是真核生物,具有生物膜系统,能对初始rHSA多 肽进行加工才能形成正确的空间结构,获得的 HSA才有活 性,而大肠杆菌是原核生物,细胞中不具有膜结构的细胞 器,无法对初始rHSA多肽进行加工. (５)为证明rHSA具有医用价值,需确认rHSA与天然的 HSA的生物学功能是否一致. 答案:(１)总 RNA (或 mRNA) (２)B (３)吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成 功转化 (４)水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始rHSA 多肽 进行高效加工 (５)HSA 大题突破１４　细胞工程 １．解析:(１)实验前给小鼠甲注射病毒 A,是为了诱导小鼠 甲产生能够分泌抗病毒 A抗体的B淋巴细胞. (２)取小鼠的脾脏,剪碎组织,用胰蛋白酶处理获得单个 细胞,加入培养液可以制成单细胞悬液. (３)图中筛选１需要用到选择培养基,只有杂交瘤细胞可 以存活.筛选２是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细 胞,该过程要用到抗原抗体杂交,故筛选所依据的原理 是抗原－抗体反应具有特异性. (４)获得能产生抗病毒 A 的单克隆抗体的杂交瘤细胞 后,可以在体外培养液中进行培养,或在小鼠的腹腔中 进行培养,使杂交瘤细胞大量增殖. 【点睛】　制备单克隆抗体的过程中,需要用到动物细胞 融合和动物细胞培养,需要用到两次筛选,第一次筛选 的目的是获得杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是获得能 产生特定抗体的杂交瘤细胞. 答案:(１)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒 A 抗体的 B 淋巴细胞 (２)取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单 个细胞,加入培养液制成单细胞悬液 (３)选择培养基　只有