专题04 DNA和蛋白质技术-备战2020年高考生物生物技术实践专项突破（选修1）

选修一《生物技术实践》知识精讲及高考真题 专题04 DNA和蛋白质技术 血红蛋白的提取和分离（精） 多聚酶链式反应扩增DNA片段（略） DNA的粗提取与鉴定（略） 01 02 03 CONTENTS 目 录 2 DNA粗提取、PCR技术、蛋白质分离比较 DNA的粗提取与鉴定 PCR技术 分离蛋白质 实验 原理 DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精 利用DNA热变性原理体外扩增DNA 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 实验 过程 选取材料→破碎细胞，释放DNA→除杂→DNA析出与鉴定 变性→复性→延伸 样品处理→凝胶色谱操作 实验 结果 获得较纯净的DNA 获得大量DNA片段 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 实践 意义 为DNA研究打下基础 解决了DNA研究中材料不足的问题 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 凝胶色谱法与电泳法比较 凝胶色谱法 电泳法 原理 根据相对分子质量大小进行分离 根据相对分子质量大小和带电性质进行分离 介质 凝胶柱、缓冲液 电极、缓冲液 特点 相对分子质量较小的分子进入凝胶内部，路程长，移动慢；较大的在外部移动，路程短，移动快 分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度 结果 物质分离 溶解规律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 DNA 溶解 析出 蛋白质 NaCl溶液浓度从2 mol/L降低的过程中，蛋白质溶解度逐渐增大 部分发生 盐析沉淀 溶解 方法步骤 加入物质 目的 1.制备鸡血细胞液 柠檬酸钠溶液 防止血液凝固 2.提取鸡血细胞细胞核物质 20ml蒸馏水 加速血细胞破裂 3.溶解细胞核内的DNA 2mol/L的NaCl溶液 溶解DNA 4.析出含DNA的粘稠物 蒸馏水 使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地释出 5.滤取含DNA的粘稠物 使含DNA的黏稠物被留在纱布上 6.将DNA的粘稠物再溶解 2mol/L的NaCl溶液 溶解DNA 7.过滤含DNA的NaCl溶液 除去含DNA的滤液中的杂质 8.提取含杂质较少的DNA 冷却的95%的冷酒精 提取DNA 9.DNA的鉴定 2mol/L的NaCl溶液 二苯胺（沸水浴） 出现蓝色 PCR的概念 PCR全名