内容正文:
线上周测三(4. 4)
生物
(时间:40 分钟,满分:90 分)
1.(15分)基因工程中可以通过 PCR技术扩增目的基因。 回答下列问题。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因 文库中获得。基因文库包括 和 。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是 。在体外利 用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的 。
(3)目前在 PCR 反应中使用 Taq 酶而不使用大肠杆菌 DNA 聚合酶的主要原因是
。
2.(15分)回答下列问题:
(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒 重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达,该研究除证明了质粒可以作为载体外, 还证明了 (答出两点即可)。
(2)体外重组的质粒可通过 Ca2+参与的 方法导入大肠杆菌细胞:而 体外重组的噬菌体 DNA 通常需与 组装成完整噬菌体后,才能通过侵染 的方法将重组的噬菌体 DNA 导入宿主细胞,在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可 作为重组噬菌体宿主细胞的是 。
(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可 能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用 的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加 的抑制剂。
3.(15分)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下 会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某 种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在 GFP 基因的 5′末端,获得了 L1-GFP 融合 基因(简称为甲),并将其插入质粒 P0,构建了真核表达载体 P1,其部分结构和 酶切位点的示意图如下,图中 E1~E4 四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题:
(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒 P0 时,使用了两种限制酶,这两种酶是
。使用这两种酶进行酶切是为了保证 ,也是为了保证
。
(2)将 P1 转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则 说明 L1 基因在牛的皮肤细胞中完成了 _和