专题04 DNA和蛋白质技术（复习课件）-2019-2020学年高二生物下学期知识梳理及过关检测含课件（人教版选修1）(共30张PPT)

专题04 DNA与蛋白质技术 学科网 精品资源 高频考点突破 专题4 　DNA和蛋白质技术 基础自主梳理 命题视角剖析 即时达标训练 基础自主梳理 一、血红蛋白的提取和分离 1．凝胶色谱法：也称____________，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 2．电泳 (1)概念：电泳是指__________在电场的作用下发生迁移的过程。 (2)特点：电泳利用待分离样品中各种分子________的差异以及分子本身的大小、____的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 分配色谱法 带电粒子 带电性质 形状 3．实验操作 (1)样品处理：通过红细胞的洗涤、搅拌、离心等操作收集到血红蛋白溶液。 (2)粗分离：通过透析去除血红蛋白溶液中的_______________较小的杂质。 (3)纯化：通过______________分离相对分子质量不同的蛋白质。 (4)纯度鉴定：用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行样品纯度鉴定。 相对分子质量 凝胶色谱法 二、PCR技术扩增DNA片段 1．PCR技术 (1)PCR：_______________的简称，是一种体外迅速扩增____________的技术。 (2)扩增方向：总是从子链的5′端向__端延伸。 (3)引物特点：是一小段______或DNA，能与DNA母链的一段碱基序列互补配对，用于PCR的引物长度通常为________个核苷酸。 (4)原理：DNA复制原理。 (5)条件：DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种________，四种脱氧核苷酸、耐热的_______________，同时控制温度。 多聚酶链式反应 DNA片段 3′ RNA 20～30 引物 DNA聚合酶 2．过程 (1)变性：当温度上升到________以上时，双链DNA解旋为单链。 (2)复性：温度下降为50 ℃左右时，两种______通过碱基互补配对与_______________结合。 (3)延伸：当温度上升到72 ℃左右时，四种脱氧核苷酸在___________的作用下，根据_____________原则合成新的DNA链。 3．结果：DNA聚合酶只能特异性地复制处于___________________序列，使这段固定长度的序列呈_______扩增。 90 ℃ 引物 两条单链DNA DNA聚合酶 碱基互补配对 两个引物之间的DNA 指数 高频考点突破 1．基本原理 (1)血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得含核DNA的溶液。 (2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。 (3)DNA不溶于酒精溶液；不被蛋白酶所水解；可被二苯胺染成蓝色。 DNA的粗提取与鉴定 2．方法目的 方法 目的 溶于NaCl溶液中并稀释 (1)NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质 (2)当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质 加入冷却酒精(95%) DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质 加入二苯胺，并沸水浴 鉴定DNA (1)实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。 (2)预冷的酒精溶液具有以下优点 ①抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解。 ②降低分子运动易于形成沉淀析出。 ③低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。 【易误警示】　本实验用鸡血细胞作实验材料，不能用哺乳动物的成熟红细胞，原因是哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核，但它可以作为血红蛋白提取和制备细胞膜的理想材料。 即时应用(随学随练，轻松夺冠) 1．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将提取获得的DNA的黏稠物(还含有许多杂质)分别处理如下： 第一，放入0.14 mol/L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤液A和黏稠物a。 第二，放入2 mol/L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤液B和黏稠物b。 第三，放入冷却的95%的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液C和黏稠物c。 以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含DNA少而可以丢弃的是____________________________________。 解析：在不同浓度的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同。在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度最小，DNA析出，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物a中；在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度最大，所以DNA溶解，过滤后存在于滤液B中；酒精可使DNA分子凝集，因此